Репродуктивные гормоны и маркеры ФПК
Советы, рецептыРепродуктивные гормоны и маркеры ФПК Фолликуло-стимулирующий гормон, лютеинизирующий гормон ФСГ и ЛГ секретируются гонадотропными клетками передней доли гипофиза. 
Гонадотропины ФСГ и ЛГ, хориогонадотропин ХГ и тиротропин ТТГ являются гликопротеинами, молекулы которых состоят из двух ковалентно связанных субъединиц, а и ß . а-субъединицы ФСГ, ЛГ, ТТГ и ХГ идентичны, а ß-субъединицы специфичны для каждого гормона и определяют их биологическую активность. Небольшое количество свободных субъединиц могут циркулировать в крови, однако возможность любого из биологических эффектов реализуется лишь при условии ассоциации а-цепи с ß-цепью. Секреция ФСГ и ЛГ гонадотропными клетками передней доли гипофиза контролируется следующими факторами: а) Гонадотропин-рилизинг гормон ( Gn - RH ), известным также как ЛГ-рилизинг гормоном ( LH - RH ), или как люлиберин. LH - RH является декапептидом, секретируемым гипоталамусом. LH - RH и его синтетические химические аналоги широко используются в терапевтических и диагностических целях (LH-RH-тест). LH - RH секретируется в портальную венозную систему гипофиза, где он стимулирует образование и пульсирующую секрецию ЛГ и, в меньшей степени, ФСГ. б) стероидными гормонами, вырабатываемыми половыми железами. Именно эстрогены и гестагены контролируют секрецию гонадотропина по принципу положительной или отрицательной обратной в) ингибином (гликопротеином, синтезируемым клетками Сертолли в процессе сперматогенеза и специфически ингибирующим секрецию ФСГ). Эффект гонадотропинов реализуется через специфические рецепторы на поверхности клеточной мембраны. В этом процессе участвует важный межклеточный медиатор циклический аденозин монофосфат (цАМФ, сАМР). Гонадотропины выводятся из организма с мочой. Так как их биологическая активность и иммунологические свойства в значительной мере остаются неизменными, концентрация этих гормонов в моче здоровых людей соответствует их концентрации в периферической крови. Функции гонадотропинов у детей У детей препубертатного периода уровни гонадотропинов и половых стероидов очень низкие. Во время пубертатного периода чувствительность гипофиза к LH - RH возрастает, в результате чего увеличивается секреция гонадотропинов, секреция половых стероидов и развиваются вторичные половые признаки. Функции гонадотропинов у мужчин У мужчин ЛГ стимулирует синтез тестостерона в клетках Лейдига, ФСГ стимулирует сперматогенез, синтез ингибина и андроген-связывающего белка в семенных канальцах, а также превращение тестостерона в 17- ß-эстрадиол в клетках сертоли. И тестостерон, и эстрогены оказывают ингибирующий эффект на секрецию гонадотропина посредством гипоталамического подавления L Н- RH. Функции гонадотропинов у женщин а) У женщин детородного периода секреция гонадотропинов является наиболее важным условием поддержания менструального цикла. В последние несколько дней предыдущего цикла снижение концентрации стероидных гормонов повышает секрецию ФСГ, что стимулирует рост нескольких граафовых пузырьков. Один из фолликулов развивается более интенсивно, остальные - атрофируются. Растущий созревающий фолликул продуцирует повышающиеся количества эстрогенов, которые оказывают мягкий ингибирующий эффект на секрецию ФСГ. В конце фолликулярной фазы секреция эстрогенов резко возрастает и достигает максимума непосредственно перед овуляцией. Обратная связь концентраций гормонов из отрицательной становится положительной, что выражает ся в овуляторных пиках уровней ЛГ и ФСГ. Овуляция, завершающаяся разрывом фолликула и превращением его в желтое тело, приводит также к падению уровней гонадотропинов и эстрогенов на фоне повышающегося уровня прогестерона. Лютеинизация гранулезных клеток наступает при вторичном подъеме концентрации эстрогенов параллельно с возрастанием уровня прогестерона до максимума в середине лютеиновой фазы. Желтое тело рассасывается, и уровень стероидных гормонов падает к концу цикла, что приводит к отмене ингибирования секреции LH - RH гипоталамусом. Секреция гонадотропинов возрастает и начинается новый цикл. б) В перименопаузе циклическая активность яичников снижается вплоть до полного угасания. Циклы в перименопаузе часто бывают ановуляторными и характеризуются значительной флюктуацией уровней стероидных и гипофизарных гормонов. В последствии все примордиальные фолликулы перестают реагировать на гонадотропную стимуляцию под воздействием стероидных гормонов. в) В менопаузе исчезает отрицательная обратная связь и уровни гонадотропинов, в частности, ФСГ, значительно повышаются по сравнению с детородным периодом. Рис.1. Динамика концентраций гонадотронпинов (ГТ), эстрадиола (Е2) и прогестерона (Пр) в крови на протяжении менструального цикла и при наступлении беременности. Патология женщины детородного периода Если исключается возможность гиперпролактинемии, определение ФСГ представляет собой первую часть исследований нарушений менструального цикла. Рекомендуется проводить одно временное определение ФСГ, ЛГ и пролактина в первой пробе крови. Повышенные уровни ФСГ обычно являются индикатором необратимой недостаточности функции яичников (за исключением очень редкого синдрома резистентности яичников). Пониженная или нормальная концентрация ФСГ при пониженной концентрации ЛГ имеет место при нарушении функции гипофиза или гипоталамуса. Если секреция эстрогенов понижена (при отрицательном анализе на прогестерон), овуляцию можно индуцировать гонадотропинами (Прегонал) или пульсирующим введением LH - RH . Если секреция эстрогенов в норме, лечение нужно начать с кломифена. Незначительное повышение концентрации ЛГ при нормальной концентрации ФСГ может наблюдаться при синдроме поликистозных яичников (РСО, синдром Штейна-Левенталя). Возникновение синдрома связано с гиперсекрецией андрогенов и замедленным синтезом эстрогенов яичниками, что компенсируется их ускоренным синтезом в периферии. Таким образом, уровень эстрогенов в сыворотке крови остается в норме. Довольно часто в этом случае наблюдается незначительная гиперпролактинемия. У женщин с анорексией уровень гонадотропинов понижен. При стимуляции LH - RH наблюдается повышение содержания ФСГ, уровень ЛГ остается неизменным или незначительно возрастает. Девочки пубертатного периода При замедленном половом развитии диагностика проводится по схеме, приведенной для случаев недостаточности яичников. При повышенном уровне ФСГ необходимо провести полное эндокринологическое и генетическое обследование. В случаях преждевременного созревания концентрация гонадотропинов часто бывает повышен ной по сравнению с нормальными для данного возраста уровнями. Диагностический тест с LH - RH часто приводит к резкому повышению секреции ЛГ. У женщин в менопаузе пониженное содержание гонадотропинов наблюдается при проведении заместительной терапии ( HRT ) или у пациенток с эстроген-продуцирующими опухолями. Низкие уровни гонадотропинов также обнаруживаются при гипофизарной недостаточности. Мужчины Определение ФСГ проводят в случае подозрения на недостаточность половых желез в результате обнаружения азооспермии или олигоспермии. Высокий уровень ФСГ указывает на первичную тестикулярную недостаточность. Показания к проведению исследований: Женщины детородного периода: • Нарушения менструального цикла и аменорея • Бесплодие • Недостаточность яичников • Синдром поликистоза яичников • Анорексия • Гипофизарная недостаточность Девочки пубертатного периода: • Гипофизарная недостаточность • Преждевременное половое созревание • Замедленное половое созревание • Недостаточность яичников • Анорексия Женщины в менопаузе: • Гипофизарная недостаточность • Метроррагия • Гормональная заместительная терапия ( HRT ) Мужчины: • Гипофизарная недостаточность • Азооспермия, олигоспермия Подготовка проб для анализа и содержание гонадотропинов в норме. Уровни гонадотропинов не имеют циркадного ритма. Пульсирующий характер секреции с интервалами в 1-2 часа особенно характерен для ЛГ, поэтому результаты единичных анализов следует считать приблизительными. Образцы сыворотки или плазмы крови после образования сгустков и/или отделения эритроцитов стабильны в течение времени, достаточного для пересылки образцов по почте. Замороженные образцы можно хранить в течение длительного периода времени. Не рекомендуется использовать гемолизированные, липемические или иктерические образцы, так как это может оказать влияние на результаты анализа. Снижение уровня гормонов может наблюдаться при приеме оральных контрацептивов, фенотиазинов, эстрогенов. Современные иммуноанализы ЛГ и ФСГ основаны на использовании моноклональных антител, которые не имеют перекрестной реакции с ХГ. ФСГ, (мМЕ/л) ЛГ, (мМЕ/л) Мужчины 0,7-1,1 0,8-7,6 Женщины Фолликулярная фаза 2,8 — 11,3 1,1-11,6 Овулятрный пик 5,8-21 17-77 Лютеиновая фаза 1,2-9,0 0-14,7 Постменопауза 21,7-153 11,3-40 Препубертатные дети <1 <1 Биологический материал : • сыворотка крови • гепаринизированная плазма крови Пролактин Пролактин человека - полипептид с молекулярной массой около 23 000 Да. В циркулирующей крови он находится в мономерной форме или в форме полимеров с различной биологической активностью. Количественное соотношение этих форм меняется при различных физиологических состояниях. По своей структуре пролактин имеет высокую степень подобия с гормоном роста и плацентарным лактогеном, возможно из-за их общего эволюционного происхождения. Биологический период полу-жизни пролактина около 15-20 мин. О способе выведения его из организма до настоящего времени известно немного. Физиологические функции пролактина Пролактин секретируется лактотропными клетками передней доли гипофиза Его секрецию гипотапамусом контролирует сложная система, в которой преобладает ингибирование (в результате перерезания ножки гипофиза секреция пролактина увеличивается). Дофамин — наиболее важное эндогенное соединение, ингибирующее секрецию пролактина, которое, возможно, идентично так называемому пролактин-ингибирующему фактору (PIF). Адреналин, норадреналин, ацетилхолин, соматостатин и простагландины не оказывают такого сильного влияния на секрецию пролактина. Тиреолиберин (TRH) стимулирует секрецию пролактина, но не является физиологическим триггерным фактором. Другими эндогенными стимуляторами секреции пролактина являются: гамма -амино масляная кислота ( GAВA ), серотонин и мелатонин. На секрецию пролактина влияет также уровень эстрогенов. Высокие уровни эстрогенов стимулируют секрецию пролактина посредством ингибирования синтеза дофамина, а низкие их уровни, вероятно, ингибируют секрецию пролактина посредством увеличения чувствительности гипофиза к дофамину. Основной физиологической функцией пролактина является запуск и поддержание процесса лактации. Во время беременности секреция пролактина постоянно возрастает в результате ускоренного синтеза эстрогенов в фето-плацентарной системе. Эстрогены и пролактин подготавливают молочную железу к лактации, воздействуя на процесс дифференциации альвеол и протоков. Уровень пролактина повышен в амниотической жидкости и оболочках плода. Возможно, пролактин играет важную роль в формировании легочной ткани эмбриона. Новорожденные имеют относительно высокий уровень пролактина, который снижается в течение нескольких первых месяцев жизни, пока не достигнет уровня, характерного для детского возраста. Если женщина не кормит грудью, уровень пролактина после родов приходит в норму в течение 4 недель. У кормящих женщин уровень пролактина снижается медленнее, так как кормление стимулирует его секрецию. Существует теория, что физиологический уровень пролактина необходим для нормального функционирования репродуктивной системы у обоих полов. Однако физиологическая роль пролактина у мужчин пока не доказана. Патология: Гиперпролактинемия ослабляет функцию гонад обоих полов. У женщин она вызывает нарушения менструального цикла вследствие недостаточности лютеиновой фазы, олигоменорею, аменорею, которая может сочетаться с галактореей. У мужчин она сопровождается потерей либидо или импотенцией. Механизм этого не совсем ясен, но, возможно, он сходен с ингибированием циклической функции яичников у кормящих грудью женщин. Наиболее распространенные причины гиперпролактиемии следующие: • секретирующие пролактин опухоли гипофиза, так называемые пролактиномы. • расположенные над турецким седлом опухоли гипофиза, тормозящие выработку и транспорт дофамина. • повреждения ножки гипофиза, приводящие к такому же эффекту. • эктопический синтез пролактина Кроме того повышение уровня пролактина может быть при: • первичном гипотиреозе • поликистозе яичников • почечной недостаточности Однако уровень пролактина не является единственным фактором, ответственным за возникновение клинических проявлений гиперпролактинемии. Изменение соотношения форм пролактина с различной биологической активностью или изменение количества рецепторов к пролактину могут также быть причиной возникновения данного заболевания. Именно поэтому в литературе описаны отдельные случаи нормального менструального цикла и беременности при наличии выраженной гиперпролактинемии, а с другой стороны, у бесплодных женщин с нормальным уровнем пролактина отмечен хороший терапевтический эффект при применении препаратов, подавляющих секрецию пролактина. Отдельным клиническим случаем является так называемая "латентная гиперпролактинемия", которая подтверждается в тесте стимуляции метоклопрамидом. Если гиперпролактинемия подтверждается при анализе нескольких проб крови и исключена фармакологическая причина повышения уровня пролактина, необходимо провести тщательную проверку на наличие опухолей гипофиза ( RTG обследование турецкого седла, СТ области седла проверка угла зрения, тесты на стимуляцию и подавление и т.п.). Вероятность наличия опухоли тем выше, чем выше уровень пролактина. Рис.2. Содержание пролактина в сыворотке крови здоровых женщин и пациенток с гиперпролактинемией. Определение уровня пролактина является важным моментом для оценки эффективности проведенного оперативного или консервативного лечения у пациентов с опухолями гипофиза. Лечение таких больных должно всегда проводится под наблюдением эндокринолога. Показания к проведению исследований: Женщины детородного периода: • Нарушения менструального цикла и аменорея • Бесплодие • Нарушения лактации • Галакторрея • Синдром гиперфункции гипофиза • Недостаточность гипофиза • Заместительная терапия после удаления опухоли гипофиза Мужчины: • Тестикуляная недостаточность • Азооспермия, олигоспермия • Галакторрея • Синдром гиперфункции гипофиза • Недостаточность гипофиза • Заместительная терапия после удаления опухоли гипофиза Подготовка проб для анализа и содержание пролактина в норме Информация, приведенная выше для гонадотропинов, справедлива и по отношению к пролактину. Однако, пролактин имеет довольно выраженный циркадный ритм с максимальным выбросом гормона во время ночного сна. Поэтому кровь для анализа берут утром, не ранее, чем через 3 часа после пробуждения. Рис.3. Суточный ритм секреции пролактина (индивидуальные графики). Кроме того, уровень пролактина может повышаться в результате физического или эмоционального стресса, воздействий на молочные железы или операций на грудной клетке, после пребывания в сауне, а также после принятия спиртных напитков. Секрецию пролактина стимулирует ряд лекарственных препаратов: фенотиазиды, трициклические антидепрессанты, метилдофа, галоперидол, хлорпромазин, резерпин, циметидин и другие. Концентрация пролактина выражается в нг/мл. Для перевода концентрации в мкМЕ/мл необходимо использовать следующее соотношение: 1 нг/мл = 30,3 мкМЕ/мл Пролактин нг/мл мкМЕ/л Мужчины 2,5-17 53-360 Женщины Фолликулярная фаза 4,5- 33 98-784 Середина цикла 6,3-49 134-975 Лютеиновая фаза 4,9- 40 104-848 Биологический материал: • сыворотка крови • гепаринизированная плазма крови ß- Эстрадиол (Е2) 17 ß-Эстрадиол — наиболее активный эстроген в периферической крови, секретируемый, в основном, яичниками, а также в меньшем количестве плацентой, надпочечниками и яичками. С точки зрения биосинтеза эстрадиол представляет собой производное холестерина, а его непосредственными пред шественниками являются андростендион и тестостерон. Более 98 % эстрадиола циркулирует в связанном с белками сыворотки крови состоянии, в основном с ГСПГ . Только небольшая часть эстрадиола находится в свободной форме и является носителем гормональной биологической активности. Эстрадиол быстро трансформируется в эстрон с меньшей биологической активностью, а затем в сульфат эстрона. Образование в организме сульфатов и глюкуронидов снижает эффективность метаболизма производных эстрадиола. Физиологические функции эстрадиола у женщин Наиболее значительное воздействие эстрогены оказывают на эндометрий, слизистую влагалища и шейку матки. Они также влияют на развитие молочных желез и тормозят выработку гонадотропинов как у мужчин, так и у женщин Биологический эффект эстрогенов осуществляется путем связывания с цитоплазматическими рецепторами эстрогенов в клетках тканей-мишеней. Половое созревание Эстрогены играют ключевую роль в формировании и развитии женских половых органов, а также вторичных половых признаков. Они также ускоряют рост трубчатых костей в длину, а затем, воз действуя на эпифиз, вызывают остановку дальнейшего роста. Детородный период Эстрадиол поступающий в периферическое кровообращение, почти исключительно секретируется яичниками. Под воздействием ЛГ в поверхностных клетках фоликулов происходит синтез предшественников андрогенов, андростендиона и тестостерона, из которых в гранулезных клетках, стимулированных ФСГ, образуются эстрогены. Изменение уровней эстрадиола в нормальном менструальном цикле описано в разделе, посвященном гонадотропинам. Менопауза В менопаузе синтез эстрогенов затухает, и их уровень в сыворотке крови снижается до очень низких значений. Физиологические функции эстрадиола у мужчин У мужчин часть эстрогенов синтезируется яичками, а другая часть образуется в периферических тканях путем ароматизации тестикулярных и надпочечниковых андрогенов. У мужчин в возрасте до 50 лет 20 % эстрадиола секретируется яичками, 60 % образуется в процессе ароматизации тесто стерона, а остальные 20 % - при восстановлении эстрона. В возрасте между 50 и 60 годами доля эстрадиола, синтезируемая яичками, относительно возрастает вследствие резкого снижения секреции андрогенов корой надпочечников. Патология: Девочки пубертатного периода и женщины детородного возраста: • Гиперэстрогенемия • Феминизация у детей • Гормонсекретирующие опухоли яичника • Гиперплазия надпочечников • Гипоэстрогенемия • Гипоганадизм • Центральная анорексия (за счет снижения уровня гонадотропинов и нарушения синтеза эстрогенов) • Прием гормональных контрацептивов Женщины в менопаузе: Гиперсекреция эстрогенов (т.е. менопаузальная метроррагия) может быть вызвана двумя причинами: • повышенным периферическим синтезом • секрецией эстрогенов опухолевыми тканями. Мужчины: Гиперсекреция эстрогенов : • повышенная периферическая ароматазная активность, • изменения в метаболизме эстрогенов, возникшие из за нарушений функции печени (напр., по причине алкоголизма) • эстрогенсекретирующие опухоли (в том числе тестикулярные). Кроме того, гиперэстрогенемия может наблюдаться при гипертиреозе. Показания к проведению исследований: Девочки пубертатного периода: • Замедленное половое созревание • Ментальная анорексия • Овариальная недостаточность Женщины детородного периода: • Овариальная недостаточность • Нарушения менструального цикла • Бесплодие • Контроль за процессом индуцированной овуляции • Мониторинг при экстракорпоральном оплодотворении • Предупреждение синдрома гиперстимуляции • Поликистоз яичников • Гипофизарная недостаточность Женщины в менопаузе: • Гипофизарная недостаточность • При назначении гормональной заместительной терапии ( HRT ) и во время ее мониторинга • Менопаузальная метроррагия • Опухоли яичников и надпочечников Мониторинг терапии тамоксифеном (уровень эстрадиола может служить индикатором эстрогенного статуса и помочь в оценке содержания рецепторов к прогестерону в опухолевых тканях). Мужчины: • Опухоли • Азооспермия, олигоспермия • Заболевания печени Уровни эстрадиола в норме Концентрации эстрадиола выражаются в пг/мл или пмоль/л. Для перевода пг/мл в пмоль/л необходимо использовать следующее соотношение: 1 пг/мл = 0,0037 пмоль/л. Нужно иметь в виду, что на фоне приема пероральных контрацептивов показатели эстрадиола могут быть занижены. Эстрадиол пг/мл пмоль/л Мужчины <56 <206 Женщины Фолликулярная фазф 0 –160 0-587 Предовуляторная фаза 34 – 400 124-1468 Лютеиновая фаза 27 – 246 101-905 Менопауза <30 <110 Препубертатные дети старше 5 лет <30 <110 Биологический материал: • Сыворотка крови • Гепаринизированная плазма крови Прогестерон Прогестерон — природный гестаген, принадлежащий к группе С21 -стероидов. У небеременных женщин основное количество прогестерона синтезируется яичниками и, в меньшей степени, корой надпочечников. Около 97 % прогестерона находится в связанном состоянии с альбумином и другими транспортными белками: тироксинсвязывающим глобулином и кортикостероидсвязывающим глобулином. Период биологической полужизни прогестерона очень короткий. На 2/3 он метаболизируется в печени и выводится с мочой в виде сульфата или глюкуронида прегнадиола. Некоторые из 5 ß-восстановленных метаболитов прогестерона вызывают повышение базальной температуры тела во время лютеиновой фазы. Физиологическая функция прогестерона Уровень секретируемого яичниками прогестерона остается низким во время фолликулярной фазы. Под воздействием структурных и биохимических изменений в фолликуле, достигающих пика при овуляции, лютеинизация гранулезных клеток завершается разрывом фолликула и образованием желтого тела. Это приводит к значительному увеличению синтеза прогестерона, уровень которого достигает максимума примерно за 7 дней до начала менструации. Биологическая роль прогестерона заключается в подготовке стимулированного эстрогенами эндометрия к имплантации оплодотворенной яйцеклетки. Синтез прогестерона желтым телом возрастает при воздействии ЛГ и хорионического гонадотропина (ХГ). Только что образовавшееся желтое тело содержит наибольшее количество рецепторов, специфичных к ХГ. После имплантации яйцеклетки ХГ стимулирует синтез прогестерона желтым телом беременности до появления плаценты на 8 неделе развития плода. На этом этапе прогестерон начинает синтезироваться плацентой и его главной функцией становится снижение сократительной способности матки для сохранения беременности. Патология: Повышение концентрации прогестерона: • Врожденная гиперплазия надпочечников, обусловленная дефицитом 21- ß-, 17- ß- и 11- ß-монооксигенов • Хорионэпителиома яичника • Липидоклеточная опухоль яичника Снижение концентрации: • Угроза выкидыша • Синдром галактореи-аминореи • Прием гормональных контрацептивов Показания к проведению исследований: • Овариальная недостаточность • Нарушения менструального цикла и аменорея • Карцинома молочной железы (параллельно с определением рецепторов прогестерона) Уровни прогестерона в норме Влияние на результаты анализа связывающих белков устраняется использованием соответству ющих блокирующих агентов. Результаты выражаются в нмоль/л и нг/мл (1 нг/мл = 0,3145 нмоль/л). Прогестерон (нг/мл) (нмоль/л) Мужчины (20 - 70 лет) 0 – 0,75 0 – 2,4 Женщины Фолликулярная фаза 0 - 1,13 0 -3,6 Овуляторный пик 0,48- 1,72 1,52 – 5,36 Лютеиновая фаза 0,95 - 21 3,02 –66,8 Менопауза 0 - 1 0 – 3,18 Биологический материал: • сыворотка крови • гепаринизированная плазма крови Тестостерон Тестостерон является наиболее важным андрогенным и природным анаболическим гормоном мужчин и женщин. Его предшественниками являются дельта-5-прегненолон и прогестерон; важными промежуточными продуктами являются дегидроэпиандростерон и андростендион. У мужчин он синтез ируется преимущественно в семенниках клетками Лейдига; у женщин - корой надпочечников и яичниками, а также в результате периферического метаболизма. 97- 98 % тестостерона циркулирует в крови в связанном состоянии. Основными связывающими белками являются ГСПГ и альбумин. Только свободный тесто стерон (около 2 % у мужчин и 1 % у женщин) обладает биологической активностью. Физиологическая функция тестостерона Нормальная секреция тестостерона необходима для поддержания функции воспроизведения у мужчин. Тестостерон контролирует сперматогенез, функцию простаты и потенцию. У обоих полов тестостерон стимулирует либидо, влияет на рост волос и голос. Секрецию тестостерона клетками Лейдига стимулирует ЛГ. По принципу обратной связи тестостерон, а также образующийся из него эстрадиол, модулируют секрецию гонадотропинов гипофизом. Андрогенный компонент оказывает воздействие только на ЛГ, а эстрогенный - на ФСГ, поэтому нарушения функции семенников влекут за собой повышение уровня гонадотропинов в сыворотке крови. Синтез ФСГ подавляется ингибином семенных канальцев. У женщин тестостерон секретируют яичники и кора надпочечников. Около половины тестостерона непосредственно секретируется стромой яичников, другая половина образуется в результате периферического метаболизма. Секреция тестостерона надпочечниками резко снижается у обоих полов после 50-60 лет. Патология: Маленькие дети и дети пубертатного периода Мужчины: • Недостаток андрогенов может вызвать замедленное половое созревание, бесплодие и импотенцию. • Низкий уровень тестостерона в сочетании с высоким уровнем гонадотропинов указывает на первичную тестикулярную недостаточность. Однако в некоторых случаях (например; при синдроме Клайнфельтера) уровень тестостерона может быть в норме. • Низкий уровень тестостерона в сочетании с низким или нормальным уровнем ЛГ указывает на вторичную тестикулярную недостаточность. В этом случае проводят тест стимуляции LH - RH . Пациенту назначают гонадотропины, кломифен или пульсирующее введение LH - RH . Мониторинг проводится с помощью измерения уровня тестостерона и исследования эякулята. Женщины: а) повышенные уровни тестостерона и DHEAS указывают на избыток андрогенов надпочечникового происхождения. В качестве дополнительного исследования проводят определение циркадного цикла кортизола, тест на подавление дексаметазоном и тест на стимуляцию АСТН. б) повышенный уровень тестостерона при нормальном или слегка повышенном уровне DHEAS указывает на избыток андрогенов овариального происхождения. У женщин с поликистозом яичников уровень тестостерона часто незначительно повышен; повышаются также уровни ЛГ, андростендиона и эстрона в сыворотке крови. Диагностический тест с LH - RH обычно приводит к повышению уровня ЛГ, но не ФСГ. При очень высокой концентрации тестостерона необходимо исключить наличие опухоли яичника, продуцирующей андрогены. в) нормальные уровни тестостерона и DHEAS при клинически выраженном гиперандрогенизме указывают на повышение содержания свободного тестостерона вследствие снижения связы вающей емкости ГСПГ. В случае тестикулярной феминизации пациенты имеют женский фенотип, слабый рост волос на лобке, хорошо развитые яички, расположенные либо в брюшной полости, либо в паху, и XY кариотип. Уровень тестостерона при этом соответствует нормальному мужскому уровню. Причиной заболевания является отсутствие рецепторов андрогенов в тканях-мишенях. Показания к проведению исследований: Пубертатный период: • Тестикулярные нарушения у мальчиков • Овариальные нарушения у девочек • Нарушения деятельности надпочечников у обоих полов • Замедленное половое созревание Мужчины: • Тестикулярная недостаточность • Наблюдение за ходом лечения тестикулярной недостаточности • Бесплодие • Импотенция • Гинекомастия Женщины: • Гирсутизм • Тестикулярная феминизация • Опухоли яичника, продуцирующие тестостерон • Поликистоз яичников • Нарушения менструального цикла • Аменорея • Бесплодие Уровни тестостерона в норме Изменяющийся уровень тестостерона объясняется эпизодической секрецией ЛГ. У женщин отмечен циркадный ритм тестостерона, что объясняется значительным вкладом надпочечников в синтез андрогенов. Поэтому уровень тестостерона у женщин достигает своего максимума в ранние утренние часы. Повышение концентрации тестостерона может наблюдаться при приеме барбитуратов, кломифена, эстрогенов, пероральных контрацептивов. У мужчин причинами низкого уровня тестостерона могут быть длительный алкоголизм, стресс и физическое истощение. Уровень тестостерона приводится в нмоль/л (1 нг/мл = 3,47 нмоль/л). нг/мл нмоль/л Мужчины 2,9 – 15,1 9,9 – 52,4 Женщины 0,65 – 1,19 2,3 – 4,1 Примечание: С возрастом уровень тестостерона постепенно снижается. Биологический материал: • сыворотка крови • плазма крови. Глобулин, связывающий половые гормоны (ГСПГ) ГСПГ связывает циркулирующие в крови половые гормоны (тестостерон и эстрогены), переводя их в не активную фракцию. ГСПГ синтезируется в печени. Его уровень повышается под действием эстрогенов и тиреоидных гормонов, при беременности, неврогенной анорексии, циррозе печени. Снижение уровня ГСПГ наблюдается при гипотиреозе, гиперандрогенемии, ожирении, заболеваниях печени, ведущих к снижению синтетической способности. Так как половые гормоны, связанные с ГСПГ выбывают из активного пула, снижение его уровня у женщин приводит к явлениям гиперандрогении без повышения уровня общих андрогенов. У мужчин повышение уровня ГСПГ приводит к клинике гипоандрогении при нормальном уровне общего тестостерона. Содержание ГСПГ в норме нмоль/л Мужчины 13-71 Женщины 18-114 Дегидроэпиандростерон сульфат ( DHEAS ) DHEAS является надпочечниковым андрогеном, относящимся к группе 17-кетостероидов. DHEAS образуется из сульфата холестерола. Основное количество DHEAS катаболизируется организмом и только 10 % его выделяется с мочой. Ежесуточно в кровяное русло выделяется 10 - 20 мг DHEAS (35 - 70 моль) у мужчин и 3,5 — 10 мг (12 — 35 моль) у женщин. Секреция DHEAS не имеет циркадного ритма, для этого стероида нет также специфических стероидсвязывающих сывороточных белков, поэтому концентрация DHEAS не зависит от изменения содержания этих белков в сыворотке крови. Однако DHEAS способен связываться с альбумином сыворотки крови человека. Помимо DHEAS в крови циркулирует DHEA (дегидроэпиандростерон) DHEA синтезируется в основном корой надпочечников и, частично, половыми железами. Он образуется в 4 раза медленнее, чем DHEAS , у мужчин и в 2 раза медленнее у женщин. Скорость его метаболизма значительно выше, поэтому концентрация циркулирующего DHEA может быть в 1 000 раз ниже, чем DHEAS . Высокая концентрация в крови, длинный период полу-жизни и высокая стабильность делают DHEAS отличным индикатором андрогенсекретирующей функции надпочечников. Повышенный уровень тестостерона у женщин может иметь надпочечниковое или овариальное происхождение. Результаты определения DHEAS позволяют выявить причину гиперандрогении. Патология: • Значительное повышенная концентрация DHEAS (наблюдается только при гиперандрогении надпочечникового происхождения): • андрогенсекретирующих опухолях надпоче-чников, • двусторонней врожденной гиперплазии надпочечников с гиперандрокортицизмом (дефект 21-гидроксилазы и 11- ß-гидроксилазы) • гирсутизме надпочечникового происхождения • синдром Кушинга • эктопический синтез АКТГ. • Умеренное повышение может быть при поликистозе яичников. • Снижение наблюдается при недостаточности коры надпочечников Показания к проведению исследований: • Опухоли надпочечников • Дифференциальная диагностика овариальных нарушений • Остеопороз • Задержка полового развития Содержание DHEAS в норме мкг/дл мкмоль/л Мужчины 80 – 560 2,2 – 15,2 Женщины 35 – 430 0,9 – 11,7 Биологический материал: • Кровь • Гепаринизированная плазма крови 17-гидрокси-прогестерон 17-гидроксипрогестерон – это промежуточный продукт синтеза стероидов в корковом слое надпочечников и гонадах. Основное клиническое значение определения 17ОН-прогестерона состоит в выявлении дефицита 21-гидроксилазы (фермента, под действием которого 17ОН-прогестерон превращается в11-дезоксикортизол в каскаде стероидогенеза). Дефицит 21-гидроксилазы является самой распространенной формой (90% случаев) врожденной гиперплозии коры надпочечников (ВГКН, адрено-генитальный синдром). Нарушение синтеза 11-дезоксикортизола приводит к дефициту кортизола и альдостерона, повышению уровня АКТГ, гиперплазии коры надпочечников и усилению секреции надпочечниковых андрогенов. Дефицит альдостерона приводит к формированию синдрома потери соли, который проявляется кризами у 75% новорожденных с ВГКН, в более старшем возрасте кризы могут провоцироваться интеркурентными заболеваниями. Избыточная продукция андрогенов, особенно андростендиона, вызывает вирилизацию, которая служит характерным признаком этой формы ВГКН. У девочек вирилизация начинается еще во внутриутробном периоде и к моменту рождения может достигнуть разной степени от клиторомегалии до полного сращения губно-мошоночных складок и формирования уретры, открывающейся в тело полового члена. После рождения у мальчиков и девочек наблюдается увеличение полового члена/ клитора, угри, ускоренный рост, раннее оволосение лобка. Рост детей 3-10 лет опережает сверстников, в 11-12 лет происходит закрытие эпифизарных зон, поэтому нелеченные дети остаются низкорослыми. Характерны нарушение полового развития и бесплодие, однако, лечение может обеспечить нормальное формирование вторичных половых признаков и фертильность. Особое внимание следует обратить на женщин с невыраженными проявлениями ВГКН, которые обращаются к гинекологам-эндокринологам с жалобами на нарушение менструального цикла, гирсутизм и бесплодие. Содержание 17ОН-прогестерона в норме: нг/мл новорожденные 5-30 дней 0,7-2,5 31-60 дней мальчики 0,8-5,0 девочки 0,5-2,3 дети 3-14 лет 0,7-1,7 мужчины 0,5-2,1 женщины фоликулиновая фаза 0,1-0,8 овуляция 0,3-1,4 лютеиновая фаза 0,6-2,3 постменопауза 0,13-0,5 беременные 3 триместр 2,0-12,0 Биологический материал: • Кровь • Гепаринизированная плазма крови Антитела к сперме Около 15% всех семейных пар, желающих иметь детей, страдают бесплодием. Предполагают, что у 10 из 100 бесплодных пар бесплодие имеет иммунологические причины. Одной из таких причин может быть выработка специфических антител к поверхностным белкам сперматозоидов, которые влияют на подвижность и функции мужских половых клеток. Метод иммуноферментного определения антител к сперме может быть использован для проведения скрининговых обследований по выявлению бесплодия, обусловленного иммунологическими механизамами. В случае бесплодия неясной этиологии рекомендуется проводить исследование на наличие антител к сперме обоим супругам. Показано, что тесты на выявление антител к сперме могут так же применяться для контроля за проводимой терапией. Пограничная концентрация антиспермальных антител в сыворотке 75 Е/мл. Пробы с концентрацией превышающей 75 Е/мл считаются положительными. Хорионический гонадотропин (ХГЧ) Хорионический гонадотропин — наиболее важный из гестационных гормонов. ХГЧ продуцируется клетками синцитиотрофобласта плаценты и некоторыми опухолями. Подобно гипофизарным гонадотропинам, ХГЧ является гликопротеином с молекулярной массой 40 кДа, который состоит из двух субъединиц. ß-субъединица ХГ содержит значительную часть аминокислотной последовательности ß-субъединицы ЛГ, а также 30 аминокислот на С-конце молекулы. В результате такой молекулярной гомологии возможность иммунохимической дифференциации ХГЧ и ЛГ зависит от способности антител определять небольшую часть молекулы ХГЧ, структурно отличающуюся от ЛГ. Использование моноклональных антител или специально обработанных поликлональных антител в ряде случаев делает возможным разрабатывать методы определения ХГЧ с пренебрежимо малой перекрестной реакцией с ЛГ, ФСГ и ТТГ. Физиологические функции ХГЧ Определяемые количества ХГЧ появляются в крови матери уже на 8-9 день после оплодотворения яйцеклетки. Во время первого триместра беременности уровень ХГЧ быстро возрастает, удваиваясь каждые 2-3 дня. Концентрация ХГЧ достигает своего максимума на 8-10 неделе беременности, после чего несколько снижается и остается постоянной в течение второй половины беременности. Быстрое возрастание концентрации ХГЧ в периферической крови и моче делает определение ХГЧ идеальным видом анализа для быстрой диагностики беременности. Физиологическая роль ХГЧ в ранние сроки беременности состоит в стимуляции синтеза прогестерона желтым телом. Считается также, что ХГЧ стимулирует синтез тестостерона половыми железами плода мужского пола, а также оказывает воздействие на кору надпочечников эмбриона. При удалении матки, после родов или аборта ХГЧ детектируется в течение более длительного периода, чем это следует из периода его полу-жизни. Уровень ХГЧ возвращается в норму в течение 2-3 недель после хирургического вмешательства; если уровень ХГЧ не снижается, это указывает на неполное удаление матки или эктопическую беременность. Высокий уровень ХГЧ после миниаборта указывает на продолжающуюся беременность. Патология: Беременные женщины: При внематочной беременности уровень ХГЧ в сыворотке крови и моче значительно ниже, чем при нормальной беременности в соответствующие сроки, либо его уровень повышается медленнее. Однако в случае имплантации эмбриона в достаточно благоприятном месте, уровень ХГЧ может повышаться, до значений, характерных для нормальной беременности. Таким образом, определение ХГЧ можно проводить в целях диагностики внематочной беременности. В случае положительного анализа на ХГЧ проводят дальнейшие исследования, в том числе эхографию, для дифференциации маточной и внематочной, физиологической и патологической беременности. Пониженная концентрация гормона наблюдается при угрожающем или несостоявшемся выкидыше. Для подтверждения диагноза рекомендуется проводить повторные измерения уровня ХГЧ в динамике и ультразвуковое обследование. В последние годы при повышенном уровне ХГЧ проводят определение альфа-фетопротеина (АФП) и других независимых маркеров для пренатальной диагностики синдрома Дауна. Кроме того, при повышении уровня ХГЧ необходимо исключать внутриматочную инфекцию. При пузырном заносе (хорионаденоме) происходят изменения в хориальных ворсинах. Возрастает активность клеток синцитиотрофобласта, что влечет за собой гиперсекрецию ХГЧ. Если в случае нормальной беременности уровень ХГЧ снижается после 10 недели беременности, то при хорионаденоме он продолжает возрастать и может достигнуть миллиона МЕ/л. Оптимальная диагностическая информация достигается при использовании ультразвуковой эхографии. Повышенные уровни у больных со злокачественными заболеваниями • опухоли трофобласта или терминального происхождения • рак яичек • рак яичников • хорионкарцинома • пузырный занос • рак желудка • рак печени • рак тонкой кишки • рак толстой кишки • рак почек • мелкоклеточный бронхогенный рак легких (эктопическая секреция) • рак яичников • рак молочных желез (эктопическая секреция) • рак матки Женщины: Злокачественные опухоли трофобласта. Злокачественные новообразования возникают у 5-10 % пациенток с хорионаденомой. Поэтому после удаления хорионаденомы необходимо проводить регулярное обследование пациенток до тех пор, пока уровень ХГЧ не перестанет детектироваться. В течение, как минимум, полугода анализ ХГЧ должен проводиться ежемесячно, в течение 2 последующих лет анализ проводят через более длительные промежутки времени. Определение ХГЧ при лечении пролиферирующих опухолей и хориокарцином цитостатическими агентами позволяет оценить эффективность терапии. Три отрицательных анализа с интервалами в три недели свидетельствуют о ремиссии. В дальнейшем мониторинг проводится, как в случаях беременности с пузырным заносом. Определение а-субъединицы ХГЧ имеет прогностическое значение, так как увеличение ее уровня свидетельствует об ухудшении состояния больной. Мужчины: Уровень ХГЧ определяют в случае злокачественных новообразований (например, тератом и других тестикулярных опухолей). Хотя уровень ХГЧ не всегда повышается до минимально детектируемого, или повышается только уровень свободных субъединиц, анализ ХГЧ позволяет оценить эффективность проводимой терапии. Показания к проведению исследований: Беременные женщины: • Детекция беременности • Внематочная беременность • Диагностика угрожающего выкидыша • Пузырный занос (хорионаденома) • Злокачественные опухоли трофобласта • Диагностика врожденных злокачественных опухолей плода • Хромосомные аберрации плода Мужчины и небеременные женщины: • Тестикулярные опухоли • Тератомы и тератобластомы Содержание ХГЧ в норме ( МЕ/л ) Мужчины 0-2,5 Небеременные женщины 0-5,3 Беременность: Гестационный возраст (недели) Медиана (интервал значений) 2-3 300 (150-600) 3-4 700 (360-1400) 4-5 14000. (9000 –21000) 5-6 80000 (40000 –120000.) 6-7 155000 (130000 –200000) 7-8 185000 (150000 –220000) 9 175000 (140000 –210000) 10 170000 (135000 – 205000) 11 140000 (120000 –160000) 12 115000 (100000 -130000) 13 100000 (90000 – 110000) 14 90000 (80000 – 100000) 15 31700 (15900-63400) 16 27100 (13500-54100) 17 23100 (11000-46200) 18 21600 (10800-43200) 19 18200 (9100 – 36400) 20 16400 (8200-32800) 21 14600 (7300-29200) 22 12500 (6300-23000) 23 11000 (5500 – 22000) >24 7000 (3500 – 14000) Биологический материал: • сыворотка крови • гепаринизированная плазма крови • моча • амниотическая жидкость. Альфафетопротеин (АФП ) АФП является специфическим фетальным а-глобулином с молекулярной массой 65-70 кДа. Первоначально АФП вырабатывается желтым телом. Начиная с 13 недели беременности, когда его уровень достигает максимума в сыворотке крови плода (3 мг/мл), он начинает синтезироваться печенью плода, и его уровень постепенно снижается до 0,08 мг/мл к моменту родов. В течение первого года жизни уровень АФП снижается до очень низких значений, характерных для взрослого человека. Диагностическое значение АФП во время беременности Во время физиологической беременности уровень АФП в амниотической жидкости снижается, а в материнской сыворотке, напротив, возрастает. Увеличение уровня АФП всегда служит показателем наличия серьезных нарушений. Возможность определять дефекты незаращения нервной трубки плода (расщелину позвоночника, анэнцефалию) на базе повышенного уровня АФП в амниотической жидкости, полученной при отхождении околоплодных вод на 15-20 месяце, была показана в 1970г. Затем повышенный уровень АФП в амниотической жидкости стали связывать с наличием других аномалий развития плода. Диагностика врожденных аномалий по уровню АФП в материнской сыворотке (MC АФП) основывается на тех же принципах. Так как физиологический уровень АФП зависит от срока беременности, результаты анализа МС АФП наиболее часто оценивают по отношению к среднему значению уровня АФП, характерному для данного срока Повышение уровня МС АФП в 2,5 и более раз выше нормы наблюдается при серьезных патологических состояниях, угрожающем выкидыше или гибели плода. Понижение уровня АФП по сравнению с уровнем нормально развивающейся беременности может свидетельствовать о риске рождения ребенка с трисомией по 21 хромосоме. Однако, поскольку уровень АФП при патологической беременности (при трисомии) составляет лишь 0,7 от его уровня при физиологической беременности, рекомендуется анализ АФП комбинировать с определением других независимых маркеров, например, ХГЧ или его субъединиц, свободного эстирола и др. Некоторые авторы советуют использовать анализ МС АФП в качестве дополнительного анализа при осложненной беременности. Патология: Повышенные уровни у больных со злокачественными опухолевыми заболеваниями: • первичный рак печени (за исключением анапластической формы, при которой АФП - отрицательный) • метастазы злокачественных опухолей в печень(при бронхогенной карциноме, раке молочной железы и раке прямой и сигмовидной кишки). • опухоли терминального происхождения • рак яичника • рак яичка • рак желудка • рак толстой кишки • рак поджелудочной железы • рак молочной железы • бронхиальные опухоли Повышенные уровни при заболеваниях доброкачественной этиологии : • цирроз печени • острый вирусный гепатит • хронический гепатит • хроническая почечная недостаточность Показания к проведению анализа: Беременные женщины : • Контроль за ходом 1-ого триместра беременности • Угроза выкидыша • Диагностика врожденных пороков развития • Диагностика хромосомных аберраций Пациенты с опухолями : • Гепатоцеллюлярная карцинома • Злокачественные опухоли желчного пузыря, желчных путей и поджелудочной железы • Тестикулярные опухоли • Тератомы, тератобластомы • Опухоли, имеющие эмбриональное происхождение Содержание АФП в норме Результаты обычно выражаются в МЕ/мл (1 МЕ/мл = 1,21 нг). МЕ/мл нг/мл Вне беременности 0,5 – 5,5 0,6 – 6,66 Во время беременности: Гестационный возраст (недели) Медиана (интервал), МЕ/мл 14 21,7 (10,9-21,8) 15 25,0 (12,5-50) 16 28,8 (14,4-57,6) 17 33,1 (16,5-66,2) 18 38,0 (19-76) 19 43,8 (21,9-87,6) 20 50,4 (25,2-100,8) 21 57,9 (28,9-115,8) 22 66,2 (33,1- 132,4) 23 90,0 (45-180) Биологический материал: • сыворотка • гепаринизированная плазма • амниотическая жидкость • кистозная жидкость • асцитическая жидкость Неконъюгированный эстриол Эстриол является стероидным гормоном, синтезируемым плацентой. На первой стадии синтеза, которая происходит в эмбрионе, холестерин, образующийся de novo, либо поступающий из крови матери, превращается в прегненолон, который сульфатируется корой надпочечников плода в дегидроэпиандростеронсульфат. Гидроксилирование этого соединения по 16 а-положению и отщепление сульфата сульфатазами плаценты приводит к образованию эстриола. Поскольку в образовании эстриола принимают участие как плод, так и плацента, измерение уровня эстриола может служить идеальным показателем функции фето-плацентарной системы. Физиологические функции эстриола В материнской крови только небольшая часть эстриола циркулирует в свободном состоянии, основное его количество составляет глюкуронид а-сульфата Во время беременности уровень эстриола постепенно возрастает до 40 недели. Пониженный уровень эстриола или его резкое снижение свидетельствует о патологическом состоянии плода. Определение уровней общего или свободного эстриола используют для мониторинга беременности. Уровень свободного эстриола быстрее отражает ухудшение состояния плода. Патология Определение эстриола используют для наблюдения за состоянием фетоплацентарной системы , а также для диагностики Уровень неконъюгированного эстриола снижается при : • осложненном течении беременности (поздний гестоз, анемия, пиелонефрит, хронические заболевания ЖКТ, патология надпочечников у беременной), сопровождающемся нарушением плацентарного кровообращения и возникновением плацентарной недостаточности, развитием гипоксии и ацидоза у плода • внутриутробной гипотрофии плода • алкогольном синдроме плода • внутриутробном инфицировании плода • некоторых видах наследственной патологии (врожденной гипоплазии надпочечников, синдроме Дауна, анэнцефалии и др.) • нарушения сульфатазной активности плаценты (редкое врожденное заболевание, связанное с Х-хромосомой). Отсутствие этого фермента блокирует синтез эстриола из предшественников, что отражается в очень низком уровне эстриола при беременности без каких-либо других признаков неблагополучия плода. Такие беременности часто заканчиваются хирургическим вмешательством в процесс родов, причем рождаются исключительно младенцы мужского пола с признаками ихтиоза, появляющегося вскоре после рождения. • применении кортикостероидов (например, для стимуляции созревания легочной ткани плода) • применении некоторых антибиотиков. Уровень неконъюгированного эстриола повышается при: • почечной недостаточности. Показания к проведению исследований: Беременные женщины : • Мониторинг состояния плода в третьем триместре беременности • Диагностика хромосомных аберраций Уровни неконъюгированного эстриола в норме Гестационный возраст (недели) Медиана, нмоль/л Интервал, нмоль/л 6-7 1,19 0,98-1,38 8-9 1,63 1,37-1,89 10-12 4,03 2,3-5,77 13-14 7,72 5,74-9,68 15-16 10,0 5,4-21,0 17-18 12,0 6,6-25,0 19-20 14,93 10,76-19,1 21-22 24,48 19,34-29,62 23-24 28,33 22,11-34,54 25-26 30,80 23,40-38,19 27-28 32,55 24,39-40,71 29-30 35,38 28,09-42,67 31-32 45,63 35,01-56,26 33-34 43,0 39,08-46,93 35-36 51,68 44,77-53,59 37-38 63,68 54,90-72,47 39-40 65,07 57,61-72,53 Трофабластический ß - гликопротеин (ТБГ) ТБГ синтезируется клетками трофобласта и является специфическим маркером беременности. В низких концентрациях (0,2-5,0 нг/мл) он определяется в крови здоровых небеременных женщин. Уже со 2 недели его уровень существенно возрастает, что позволяет использовать этот тест для ранней диагностики беременности. При нормальном течении беременности уровень ТБГ прогрессивно возрастает до 20-24 недели, затем стабилизируется и резко падает накануне родов. В послеродовом периоде содержание ТБГ через 30 – 40 часов уменьшается вдвое, а к 16 дню достигает уровня здоровых небеременных женщин. Одним из физиологических эффектов является его иммуносупрессивное действие, что необходимо для нормального развития беременности. Патология: Снижение: • Менее 500нг/мл при сроке 3-5 недель: • Внематочная беременность • Функциональная недостаточность трофобласта • Резкое снижение в более поздние сроки указывает на угрозу спонтанного преждевременного прерывания беременности (при падении в 6 раз в 100% случаев, а в 2-4 раза в 33,3% случаев) • Уменьшение концентрации ТБГ в ходе лечения угрожающего выкидыша говорит о неэффективности терапии • Медленное увеличение содержания ТБГ по мере развития беременности или стабилизации его показателей указывает на вероятность позднего выкидыша или преждевременных родов • Снижение ТБГ наблюдается при наличии у плода трисомий Повышение: • Многоплодная беременность • Сахарный диабет • Резус-конфликтная беременность (уровень ТБГ увеличивается пропорционально тяжести гемолитической болезни плода) • Перенашивание • Онкологические заболевания (мониторинг течения и эффективности терапии): • Рак матки • Рак яичников • Хорионкарцинома (ТБГ/ХГЧ = 0,1 – 1,0) • Инвазивный занос (ТБГ/ХГЧ = 1,2 – 4,5) • Пузырный занос (ТБГ/ХГЧ = 6,0 – 12,0) • Анэнцефалия плода (наряду с исследованием АФП, ХГЧ и неконьюгированного эстриола). Содержание ТБГ в норме Гестационный возраст (недели) ТБГ, нг/мл 2-3 50-150 3-4 150-300 4-5 300-500 5-6 500-1500 6-7 1500-3000 7-8 3000-5000 9 8000 - 10000 10 10000 - 13000 11 13000 - 17000 12 15000 – 18000 13 17000 – 20000 14 19000 – 24000 15 20000 –25000 16 22000 – 28000 17 25000 – 30000 18 30000 – 35000 19 32000 – 37000 20 33000 - 38000 21 35000 - 40000 22 37000 – 42000 23 40000 – 45000 24 45000 – 55000 25 55000 – 100000 26 100000 -200000 27 200000 –300000 28 300000 –400000 29 –40 400000 –500000 Биологический материал: • Кровь • Сыворота крови ПАПП-А (РАРР-А) Белок РАРР-А (pregnancy associated plazma protein A) впервые был обнаружен в сыворотке крови беременных с помощью метода иммунодиффузии в 1974г. РАРР-А вырабатывается у беременных женщин трофобластом, у небеременных - клетками гранулезы, слизистой обочлочкой маточных труб и эндометрием, а у мужчин - клетками Лейдига. Молекулярная масса РАРР-А 200 кД. В сыворотке крови беременных РАРР-А находится в комплексе с проформой основного протеина эозинофилов, что позволяет ему разрывать мембрану цистосом и оказывать повреждающее воздействие на ткани. Подобный эффект вероятно необходим в процессах нидации плодного яйца и развития трофобласта. РАРР-А принимает участие в регуляции кровотока в межворсинчатом пространстве за счет ингибирования гемолиза, индуцированного системой комплимента, угнетает активность плазмина и имеет аффинитет к гепарину. РАРР-А in vitro до-зозависимо ингибирует пролиферативную активность лимфоцитов, индуцированную лейкинами или аллогенными клетками, поэтому он входит в группу белков-иммуносупрессоров. Рост сывороточной концентрации РАРР-А при беременности зависит от массы плацентарных клеток. Прогностическая ценность по диагностике плацентарной недостаточности (ПН) у РАРР-А ниже, чем у трофобластического ?1-гликопротеина (ТБГ). При ПН уровень РАРР-А снижается, а при начавшемся самопроизвольном выкидыше, сопровождающемся деструкцией клеток синцитиотрофобласта - повышается. Особый интерес исследования РАРР-А представляют для диагностики синдромов хромосомных трисомий плода по 21 (синдром Дауна), 18 (синдром Эдвардса), 13 (синдром Патау) хромосомам в I триместре беременности. Исследования показали, что уровень РАРР-А в сыворотке крови при названных синдромах снижается в сроке 9-13 недель менее 0,5 Мом. Для синдрома Дауна снижение РАРР-А выявлено в 65%, для синдромов Эдвардса и Патау до 70% случаев, при ложноположительных результатах 5%. Обнаружено снижение РАРР-А менее 0,5 Мом при синдроме Корнелии де Ланге. Рекомендуется проводить определение РАРР-А оптимально с 9 до 11 недель (по последней менструации), за 7-10 дней до УЗИ эмбриона с измерением толщины его воротникового пространства (ТВП). Содержание РАРР-А в сыворотке крови при беременности в норме: Недели беременности по последней менструации Медиана (Мом), ug/ml Допустимые значения 0,5 Мом, ug/ml 2 Мом, ug/ml 8 2600 1300 5200 9 4200 2100 8400 10 7560 3780 15120 11 11000 5500 22000 12 15060 7530 30120 13 17000 8500 34000 14 21510 10750 43020 Коэффициенты пересчета единиц измерения: 1 mIU/ml = 450 ug/ml 1 ug/ml=2220 mIU/ml
Гонадотропины ФСГ и ЛГ, хориогонадотропин ХГ и тиротропин ТТГ являются гликопротеинами, молекулы которых состоят из двух ковалентно связанных субъединиц, а и ß . а-субъединицы ФСГ, ЛГ, ТТГ и ХГ идентичны, а ß-субъединицы специфичны для каждого гормона и определяют их биологическую активность. Небольшое количество свободных субъединиц могут циркулировать в крови, однако возможность любого из биологических эффектов реализуется лишь при условии ассоциации а-цепи с ß-цепью. Секреция ФСГ и ЛГ гонадотропными клетками передней доли гипофиза контролируется следующими факторами: а) Гонадотропин-рилизинг гормон ( Gn - RH ), известным также как ЛГ-рилизинг гормоном ( LH - RH ), или как люлиберин. LH - RH является декапептидом, секретируемым гипоталамусом. LH - RH и его синтетические химические аналоги широко используются в терапевтических и диагностических целях (LH-RH-тест). LH - RH секретируется в портальную венозную систему гипофиза, где он стимулирует образование и пульсирующую секрецию ЛГ и, в меньшей степени, ФСГ. б) стероидными гормонами, вырабатываемыми половыми железами. Именно эстрогены и гестагены контролируют секрецию гонадотропина по принципу положительной или отрицательной обратной в) ингибином (гликопротеином, синтезируемым клетками Сертолли в процессе сперматогенеза и специфически ингибирующим секрецию ФСГ). Эффект гонадотропинов реализуется через специфические рецепторы на поверхности клеточной мембраны. В этом процессе участвует важный межклеточный медиатор циклический аденозин монофосфат (цАМФ, сАМР). Гонадотропины выводятся из организма с мочой. Так как их биологическая активность и иммунологические свойства в значительной мере остаются неизменными, концентрация этих гормонов в моче здоровых людей соответствует их концентрации в периферической крови. Функции гонадотропинов у детей У детей препубертатного периода уровни гонадотропинов и половых стероидов очень низкие. Во время пубертатного периода чувствительность гипофиза к LH - RH возрастает, в результате чего увеличивается секреция гонадотропинов, секреция половых стероидов и развиваются вторичные половые признаки. Функции гонадотропинов у мужчин У мужчин ЛГ стимулирует синтез тестостерона в клетках Лейдига, ФСГ стимулирует сперматогенез, синтез ингибина и андроген-связывающего белка в семенных канальцах, а также превращение тестостерона в 17- ß-эстрадиол в клетках сертоли. И тестостерон, и эстрогены оказывают ингибирующий эффект на секрецию гонадотропина посредством гипоталамического подавления L Н- RH. Функции гонадотропинов у женщин а) У женщин детородного периода секреция гонадотропинов является наиболее важным условием поддержания менструального цикла. В последние несколько дней предыдущего цикла снижение концентрации стероидных гормонов повышает секрецию ФСГ, что стимулирует рост нескольких граафовых пузырьков. Один из фолликулов развивается более интенсивно, остальные - атрофируются. Растущий созревающий фолликул продуцирует повышающиеся количества эстрогенов, которые оказывают мягкий ингибирующий эффект на секрецию ФСГ. В конце фолликулярной фазы секреция эстрогенов резко возрастает и достигает максимума непосредственно перед овуляцией. Обратная связь концентраций гормонов из отрицательной становится положительной, что выражает ся в овуляторных пиках уровней ЛГ и ФСГ. Овуляция, завершающаяся разрывом фолликула и превращением его в желтое тело, приводит также к падению уровней гонадотропинов и эстрогенов на фоне повышающегося уровня прогестерона. Лютеинизация гранулезных клеток наступает при вторичном подъеме концентрации эстрогенов параллельно с возрастанием уровня прогестерона до максимума в середине лютеиновой фазы. Желтое тело рассасывается, и уровень стероидных гормонов падает к концу цикла, что приводит к отмене ингибирования секреции LH - RH гипоталамусом. Секреция гонадотропинов возрастает и начинается новый цикл. б) В перименопаузе циклическая активность яичников снижается вплоть до полного угасания. Циклы в перименопаузе часто бывают ановуляторными и характеризуются значительной флюктуацией уровней стероидных и гипофизарных гормонов. В последствии все примордиальные фолликулы перестают реагировать на гонадотропную стимуляцию под воздействием стероидных гормонов. в) В менопаузе исчезает отрицательная обратная связь и уровни гонадотропинов, в частности, ФСГ, значительно повышаются по сравнению с детородным периодом. Рис.1. Динамика концентраций гонадотронпинов (ГТ), эстрадиола (Е2) и прогестерона (Пр) в крови на протяжении менструального цикла и при наступлении беременности. Патология женщины детородного периода Если исключается возможность гиперпролактинемии, определение ФСГ представляет собой первую часть исследований нарушений менструального цикла. Рекомендуется проводить одно временное определение ФСГ, ЛГ и пролактина в первой пробе крови. Повышенные уровни ФСГ обычно являются индикатором необратимой недостаточности функции яичников (за исключением очень редкого синдрома резистентности яичников). Пониженная или нормальная концентрация ФСГ при пониженной концентрации ЛГ имеет место при нарушении функции гипофиза или гипоталамуса. Если секреция эстрогенов понижена (при отрицательном анализе на прогестерон), овуляцию можно индуцировать гонадотропинами (Прегонал) или пульсирующим введением LH - RH . Если секреция эстрогенов в норме, лечение нужно начать с кломифена. Незначительное повышение концентрации ЛГ при нормальной концентрации ФСГ может наблюдаться при синдроме поликистозных яичников (РСО, синдром Штейна-Левенталя). Возникновение синдрома связано с гиперсекрецией андрогенов и замедленным синтезом эстрогенов яичниками, что компенсируется их ускоренным синтезом в периферии. Таким образом, уровень эстрогенов в сыворотке крови остается в норме. Довольно часто в этом случае наблюдается незначительная гиперпролактинемия. У женщин с анорексией уровень гонадотропинов понижен. При стимуляции LH - RH наблюдается повышение содержания ФСГ, уровень ЛГ остается неизменным или незначительно возрастает. Девочки пубертатного периода При замедленном половом развитии диагностика проводится по схеме, приведенной для случаев недостаточности яичников. При повышенном уровне ФСГ необходимо провести полное эндокринологическое и генетическое обследование. В случаях преждевременного созревания концентрация гонадотропинов часто бывает повышен ной по сравнению с нормальными для данного возраста уровнями. Диагностический тест с LH - RH часто приводит к резкому повышению секреции ЛГ. У женщин в менопаузе пониженное содержание гонадотропинов наблюдается при проведении заместительной терапии ( HRT ) или у пациенток с эстроген-продуцирующими опухолями. Низкие уровни гонадотропинов также обнаруживаются при гипофизарной недостаточности. Мужчины Определение ФСГ проводят в случае подозрения на недостаточность половых желез в результате обнаружения азооспермии или олигоспермии. Высокий уровень ФСГ указывает на первичную тестикулярную недостаточность. Показания к проведению исследований: Женщины детородного периода: • Нарушения менструального цикла и аменорея • Бесплодие • Недостаточность яичников • Синдром поликистоза яичников • Анорексия • Гипофизарная недостаточность Девочки пубертатного периода: • Гипофизарная недостаточность • Преждевременное половое созревание • Замедленное половое созревание • Недостаточность яичников • Анорексия Женщины в менопаузе: • Гипофизарная недостаточность • Метроррагия • Гормональная заместительная терапия ( HRT ) Мужчины: • Гипофизарная недостаточность • Азооспермия, олигоспермия Подготовка проб для анализа и содержание гонадотропинов в норме. Уровни гонадотропинов не имеют циркадного ритма. Пульсирующий характер секреции с интервалами в 1-2 часа особенно характерен для ЛГ, поэтому результаты единичных анализов следует считать приблизительными. Образцы сыворотки или плазмы крови после образования сгустков и/или отделения эритроцитов стабильны в течение времени, достаточного для пересылки образцов по почте. Замороженные образцы можно хранить в течение длительного периода времени. Не рекомендуется использовать гемолизированные, липемические или иктерические образцы, так как это может оказать влияние на результаты анализа. Снижение уровня гормонов может наблюдаться при приеме оральных контрацептивов, фенотиазинов, эстрогенов. Современные иммуноанализы ЛГ и ФСГ основаны на использовании моноклональных антител, которые не имеют перекрестной реакции с ХГ. ФСГ, (мМЕ/л) ЛГ, (мМЕ/л) Мужчины 0,7-1,1 0,8-7,6 Женщины Фолликулярная фаза 2,8 — 11,3 1,1-11,6 Овулятрный пик 5,8-21 17-77 Лютеиновая фаза 1,2-9,0 0-14,7 Постменопауза 21,7-153 11,3-40 Препубертатные дети <1 <1 Биологический материал : • сыворотка крови • гепаринизированная плазма крови Пролактин Пролактин человека - полипептид с молекулярной массой около 23 000 Да. В циркулирующей крови он находится в мономерной форме или в форме полимеров с различной биологической активностью. Количественное соотношение этих форм меняется при различных физиологических состояниях. По своей структуре пролактин имеет высокую степень подобия с гормоном роста и плацентарным лактогеном, возможно из-за их общего эволюционного происхождения. Биологический период полу-жизни пролактина около 15-20 мин. О способе выведения его из организма до настоящего времени известно немного. Физиологические функции пролактина Пролактин секретируется лактотропными клетками передней доли гипофиза Его секрецию гипотапамусом контролирует сложная система, в которой преобладает ингибирование (в результате перерезания ножки гипофиза секреция пролактина увеличивается). Дофамин — наиболее важное эндогенное соединение, ингибирующее секрецию пролактина, которое, возможно, идентично так называемому пролактин-ингибирующему фактору (PIF). Адреналин, норадреналин, ацетилхолин, соматостатин и простагландины не оказывают такого сильного влияния на секрецию пролактина. Тиреолиберин (TRH) стимулирует секрецию пролактина, но не является физиологическим триггерным фактором. Другими эндогенными стимуляторами секреции пролактина являются: гамма -амино масляная кислота ( GAВA ), серотонин и мелатонин. На секрецию пролактина влияет также уровень эстрогенов. Высокие уровни эстрогенов стимулируют секрецию пролактина посредством ингибирования синтеза дофамина, а низкие их уровни, вероятно, ингибируют секрецию пролактина посредством увеличения чувствительности гипофиза к дофамину. Основной физиологической функцией пролактина является запуск и поддержание процесса лактации. Во время беременности секреция пролактина постоянно возрастает в результате ускоренного синтеза эстрогенов в фето-плацентарной системе. Эстрогены и пролактин подготавливают молочную железу к лактации, воздействуя на процесс дифференциации альвеол и протоков. Уровень пролактина повышен в амниотической жидкости и оболочках плода. Возможно, пролактин играет важную роль в формировании легочной ткани эмбриона. Новорожденные имеют относительно высокий уровень пролактина, который снижается в течение нескольких первых месяцев жизни, пока не достигнет уровня, характерного для детского возраста. Если женщина не кормит грудью, уровень пролактина после родов приходит в норму в течение 4 недель. У кормящих женщин уровень пролактина снижается медленнее, так как кормление стимулирует его секрецию. Существует теория, что физиологический уровень пролактина необходим для нормального функционирования репродуктивной системы у обоих полов. Однако физиологическая роль пролактина у мужчин пока не доказана. Патология: Гиперпролактинемия ослабляет функцию гонад обоих полов. У женщин она вызывает нарушения менструального цикла вследствие недостаточности лютеиновой фазы, олигоменорею, аменорею, которая может сочетаться с галактореей. У мужчин она сопровождается потерей либидо или импотенцией. Механизм этого не совсем ясен, но, возможно, он сходен с ингибированием циклической функции яичников у кормящих грудью женщин. Наиболее распространенные причины гиперпролактиемии следующие: • секретирующие пролактин опухоли гипофиза, так называемые пролактиномы. • расположенные над турецким седлом опухоли гипофиза, тормозящие выработку и транспорт дофамина. • повреждения ножки гипофиза, приводящие к такому же эффекту. • эктопический синтез пролактина Кроме того повышение уровня пролактина может быть при: • первичном гипотиреозе • поликистозе яичников • почечной недостаточности Однако уровень пролактина не является единственным фактором, ответственным за возникновение клинических проявлений гиперпролактинемии. Изменение соотношения форм пролактина с различной биологической активностью или изменение количества рецепторов к пролактину могут также быть причиной возникновения данного заболевания. Именно поэтому в литературе описаны отдельные случаи нормального менструального цикла и беременности при наличии выраженной гиперпролактинемии, а с другой стороны, у бесплодных женщин с нормальным уровнем пролактина отмечен хороший терапевтический эффект при применении препаратов, подавляющих секрецию пролактина. Отдельным клиническим случаем является так называемая "латентная гиперпролактинемия", которая подтверждается в тесте стимуляции метоклопрамидом. Если гиперпролактинемия подтверждается при анализе нескольких проб крови и исключена фармакологическая причина повышения уровня пролактина, необходимо провести тщательную проверку на наличие опухолей гипофиза ( RTG обследование турецкого седла, СТ области седла проверка угла зрения, тесты на стимуляцию и подавление и т.п.). Вероятность наличия опухоли тем выше, чем выше уровень пролактина. Рис.2. Содержание пролактина в сыворотке крови здоровых женщин и пациенток с гиперпролактинемией. Определение уровня пролактина является важным моментом для оценки эффективности проведенного оперативного или консервативного лечения у пациентов с опухолями гипофиза. Лечение таких больных должно всегда проводится под наблюдением эндокринолога. Показания к проведению исследований: Женщины детородного периода: • Нарушения менструального цикла и аменорея • Бесплодие • Нарушения лактации • Галакторрея • Синдром гиперфункции гипофиза • Недостаточность гипофиза • Заместительная терапия после удаления опухоли гипофиза Мужчины: • Тестикуляная недостаточность • Азооспермия, олигоспермия • Галакторрея • Синдром гиперфункции гипофиза • Недостаточность гипофиза • Заместительная терапия после удаления опухоли гипофиза Подготовка проб для анализа и содержание пролактина в норме Информация, приведенная выше для гонадотропинов, справедлива и по отношению к пролактину. Однако, пролактин имеет довольно выраженный циркадный ритм с максимальным выбросом гормона во время ночного сна. Поэтому кровь для анализа берут утром, не ранее, чем через 3 часа после пробуждения. Рис.3. Суточный ритм секреции пролактина (индивидуальные графики). Кроме того, уровень пролактина может повышаться в результате физического или эмоционального стресса, воздействий на молочные железы или операций на грудной клетке, после пребывания в сауне, а также после принятия спиртных напитков. Секрецию пролактина стимулирует ряд лекарственных препаратов: фенотиазиды, трициклические антидепрессанты, метилдофа, галоперидол, хлорпромазин, резерпин, циметидин и другие. Концентрация пролактина выражается в нг/мл. Для перевода концентрации в мкМЕ/мл необходимо использовать следующее соотношение: 1 нг/мл = 30,3 мкМЕ/мл Пролактин нг/мл мкМЕ/л Мужчины 2,5-17 53-360 Женщины Фолликулярная фаза 4,5- 33 98-784 Середина цикла 6,3-49 134-975 Лютеиновая фаза 4,9- 40 104-848 Биологический материал: • сыворотка крови • гепаринизированная плазма крови ß- Эстрадиол (Е2) 17 ß-Эстрадиол — наиболее активный эстроген в периферической крови, секретируемый, в основном, яичниками, а также в меньшем количестве плацентой, надпочечниками и яичками. С точки зрения биосинтеза эстрадиол представляет собой производное холестерина, а его непосредственными пред шественниками являются андростендион и тестостерон. Более 98 % эстрадиола циркулирует в связанном с белками сыворотки крови состоянии, в основном с ГСПГ . Только небольшая часть эстрадиола находится в свободной форме и является носителем гормональной биологической активности. Эстрадиол быстро трансформируется в эстрон с меньшей биологической активностью, а затем в сульфат эстрона. Образование в организме сульфатов и глюкуронидов снижает эффективность метаболизма производных эстрадиола. Физиологические функции эстрадиола у женщин Наиболее значительное воздействие эстрогены оказывают на эндометрий, слизистую влагалища и шейку матки. Они также влияют на развитие молочных желез и тормозят выработку гонадотропинов как у мужчин, так и у женщин Биологический эффект эстрогенов осуществляется путем связывания с цитоплазматическими рецепторами эстрогенов в клетках тканей-мишеней. Половое созревание Эстрогены играют ключевую роль в формировании и развитии женских половых органов, а также вторичных половых признаков. Они также ускоряют рост трубчатых костей в длину, а затем, воз действуя на эпифиз, вызывают остановку дальнейшего роста. Детородный период Эстрадиол поступающий в периферическое кровообращение, почти исключительно секретируется яичниками. Под воздействием ЛГ в поверхностных клетках фоликулов происходит синтез предшественников андрогенов, андростендиона и тестостерона, из которых в гранулезных клетках, стимулированных ФСГ, образуются эстрогены. Изменение уровней эстрадиола в нормальном менструальном цикле описано в разделе, посвященном гонадотропинам. Менопауза В менопаузе синтез эстрогенов затухает, и их уровень в сыворотке крови снижается до очень низких значений. Физиологические функции эстрадиола у мужчин У мужчин часть эстрогенов синтезируется яичками, а другая часть образуется в периферических тканях путем ароматизации тестикулярных и надпочечниковых андрогенов. У мужчин в возрасте до 50 лет 20 % эстрадиола секретируется яичками, 60 % образуется в процессе ароматизации тесто стерона, а остальные 20 % - при восстановлении эстрона. В возрасте между 50 и 60 годами доля эстрадиола, синтезируемая яичками, относительно возрастает вследствие резкого снижения секреции андрогенов корой надпочечников. Патология: Девочки пубертатного периода и женщины детородного возраста: • Гиперэстрогенемия • Феминизация у детей • Гормонсекретирующие опухоли яичника • Гиперплазия надпочечников • Гипоэстрогенемия • Гипоганадизм • Центральная анорексия (за счет снижения уровня гонадотропинов и нарушения синтеза эстрогенов) • Прием гормональных контрацептивов Женщины в менопаузе: Гиперсекреция эстрогенов (т.е. менопаузальная метроррагия) может быть вызвана двумя причинами: • повышенным периферическим синтезом • секрецией эстрогенов опухолевыми тканями. Мужчины: Гиперсекреция эстрогенов : • повышенная периферическая ароматазная активность, • изменения в метаболизме эстрогенов, возникшие из за нарушений функции печени (напр., по причине алкоголизма) • эстрогенсекретирующие опухоли (в том числе тестикулярные). Кроме того, гиперэстрогенемия может наблюдаться при гипертиреозе. Показания к проведению исследований: Девочки пубертатного периода: • Замедленное половое созревание • Ментальная анорексия • Овариальная недостаточность Женщины детородного периода: • Овариальная недостаточность • Нарушения менструального цикла • Бесплодие • Контроль за процессом индуцированной овуляции • Мониторинг при экстракорпоральном оплодотворении • Предупреждение синдрома гиперстимуляции • Поликистоз яичников • Гипофизарная недостаточность Женщины в менопаузе: • Гипофизарная недостаточность • При назначении гормональной заместительной терапии ( HRT ) и во время ее мониторинга • Менопаузальная метроррагия • Опухоли яичников и надпочечников Мониторинг терапии тамоксифеном (уровень эстрадиола может служить индикатором эстрогенного статуса и помочь в оценке содержания рецепторов к прогестерону в опухолевых тканях). Мужчины: • Опухоли • Азооспермия, олигоспермия • Заболевания печени Уровни эстрадиола в норме Концентрации эстрадиола выражаются в пг/мл или пмоль/л. Для перевода пг/мл в пмоль/л необходимо использовать следующее соотношение: 1 пг/мл = 0,0037 пмоль/л. Нужно иметь в виду, что на фоне приема пероральных контрацептивов показатели эстрадиола могут быть занижены. Эстрадиол пг/мл пмоль/л Мужчины <56 <206 Женщины Фолликулярная фазф 0 –160 0-587 Предовуляторная фаза 34 – 400 124-1468 Лютеиновая фаза 27 – 246 101-905 Менопауза <30 <110 Препубертатные дети старше 5 лет <30 <110 Биологический материал: • Сыворотка крови • Гепаринизированная плазма крови Прогестерон Прогестерон — природный гестаген, принадлежащий к группе С21 -стероидов. У небеременных женщин основное количество прогестерона синтезируется яичниками и, в меньшей степени, корой надпочечников. Около 97 % прогестерона находится в связанном состоянии с альбумином и другими транспортными белками: тироксинсвязывающим глобулином и кортикостероидсвязывающим глобулином. Период биологической полужизни прогестерона очень короткий. На 2/3 он метаболизируется в печени и выводится с мочой в виде сульфата или глюкуронида прегнадиола. Некоторые из 5 ß-восстановленных метаболитов прогестерона вызывают повышение базальной температуры тела во время лютеиновой фазы. Физиологическая функция прогестерона Уровень секретируемого яичниками прогестерона остается низким во время фолликулярной фазы. Под воздействием структурных и биохимических изменений в фолликуле, достигающих пика при овуляции, лютеинизация гранулезных клеток завершается разрывом фолликула и образованием желтого тела. Это приводит к значительному увеличению синтеза прогестерона, уровень которого достигает максимума примерно за 7 дней до начала менструации. Биологическая роль прогестерона заключается в подготовке стимулированного эстрогенами эндометрия к имплантации оплодотворенной яйцеклетки. Синтез прогестерона желтым телом возрастает при воздействии ЛГ и хорионического гонадотропина (ХГ). Только что образовавшееся желтое тело содержит наибольшее количество рецепторов, специфичных к ХГ. После имплантации яйцеклетки ХГ стимулирует синтез прогестерона желтым телом беременности до появления плаценты на 8 неделе развития плода. На этом этапе прогестерон начинает синтезироваться плацентой и его главной функцией становится снижение сократительной способности матки для сохранения беременности. Патология: Повышение концентрации прогестерона: • Врожденная гиперплазия надпочечников, обусловленная дефицитом 21- ß-, 17- ß- и 11- ß-монооксигенов • Хорионэпителиома яичника • Липидоклеточная опухоль яичника Снижение концентрации: • Угроза выкидыша • Синдром галактореи-аминореи • Прием гормональных контрацептивов Показания к проведению исследований: • Овариальная недостаточность • Нарушения менструального цикла и аменорея • Карцинома молочной железы (параллельно с определением рецепторов прогестерона) Уровни прогестерона в норме Влияние на результаты анализа связывающих белков устраняется использованием соответству ющих блокирующих агентов. Результаты выражаются в нмоль/л и нг/мл (1 нг/мл = 0,3145 нмоль/л). Прогестерон (нг/мл) (нмоль/л) Мужчины (20 - 70 лет) 0 – 0,75 0 – 2,4 Женщины Фолликулярная фаза 0 - 1,13 0 -3,6 Овуляторный пик 0,48- 1,72 1,52 – 5,36 Лютеиновая фаза 0,95 - 21 3,02 –66,8 Менопауза 0 - 1 0 – 3,18 Биологический материал: • сыворотка крови • гепаринизированная плазма крови Тестостерон Тестостерон является наиболее важным андрогенным и природным анаболическим гормоном мужчин и женщин. Его предшественниками являются дельта-5-прегненолон и прогестерон; важными промежуточными продуктами являются дегидроэпиандростерон и андростендион. У мужчин он синтез ируется преимущественно в семенниках клетками Лейдига; у женщин - корой надпочечников и яичниками, а также в результате периферического метаболизма. 97- 98 % тестостерона циркулирует в крови в связанном состоянии. Основными связывающими белками являются ГСПГ и альбумин. Только свободный тесто стерон (около 2 % у мужчин и 1 % у женщин) обладает биологической активностью. Физиологическая функция тестостерона Нормальная секреция тестостерона необходима для поддержания функции воспроизведения у мужчин. Тестостерон контролирует сперматогенез, функцию простаты и потенцию. У обоих полов тестостерон стимулирует либидо, влияет на рост волос и голос. Секрецию тестостерона клетками Лейдига стимулирует ЛГ. По принципу обратной связи тестостерон, а также образующийся из него эстрадиол, модулируют секрецию гонадотропинов гипофизом. Андрогенный компонент оказывает воздействие только на ЛГ, а эстрогенный - на ФСГ, поэтому нарушения функции семенников влекут за собой повышение уровня гонадотропинов в сыворотке крови. Синтез ФСГ подавляется ингибином семенных канальцев. У женщин тестостерон секретируют яичники и кора надпочечников. Около половины тестостерона непосредственно секретируется стромой яичников, другая половина образуется в результате периферического метаболизма. Секреция тестостерона надпочечниками резко снижается у обоих полов после 50-60 лет. Патология: Маленькие дети и дети пубертатного периода Мужчины: • Недостаток андрогенов может вызвать замедленное половое созревание, бесплодие и импотенцию. • Низкий уровень тестостерона в сочетании с высоким уровнем гонадотропинов указывает на первичную тестикулярную недостаточность. Однако в некоторых случаях (например; при синдроме Клайнфельтера) уровень тестостерона может быть в норме. • Низкий уровень тестостерона в сочетании с низким или нормальным уровнем ЛГ указывает на вторичную тестикулярную недостаточность. В этом случае проводят тест стимуляции LH - RH . Пациенту назначают гонадотропины, кломифен или пульсирующее введение LH - RH . Мониторинг проводится с помощью измерения уровня тестостерона и исследования эякулята. Женщины: а) повышенные уровни тестостерона и DHEAS указывают на избыток андрогенов надпочечникового происхождения. В качестве дополнительного исследования проводят определение циркадного цикла кортизола, тест на подавление дексаметазоном и тест на стимуляцию АСТН. б) повышенный уровень тестостерона при нормальном или слегка повышенном уровне DHEAS указывает на избыток андрогенов овариального происхождения. У женщин с поликистозом яичников уровень тестостерона часто незначительно повышен; повышаются также уровни ЛГ, андростендиона и эстрона в сыворотке крови. Диагностический тест с LH - RH обычно приводит к повышению уровня ЛГ, но не ФСГ. При очень высокой концентрации тестостерона необходимо исключить наличие опухоли яичника, продуцирующей андрогены. в) нормальные уровни тестостерона и DHEAS при клинически выраженном гиперандрогенизме указывают на повышение содержания свободного тестостерона вследствие снижения связы вающей емкости ГСПГ. В случае тестикулярной феминизации пациенты имеют женский фенотип, слабый рост волос на лобке, хорошо развитые яички, расположенные либо в брюшной полости, либо в паху, и XY кариотип. Уровень тестостерона при этом соответствует нормальному мужскому уровню. Причиной заболевания является отсутствие рецепторов андрогенов в тканях-мишенях. Показания к проведению исследований: Пубертатный период: • Тестикулярные нарушения у мальчиков • Овариальные нарушения у девочек • Нарушения деятельности надпочечников у обоих полов • Замедленное половое созревание Мужчины: • Тестикулярная недостаточность • Наблюдение за ходом лечения тестикулярной недостаточности • Бесплодие • Импотенция • Гинекомастия Женщины: • Гирсутизм • Тестикулярная феминизация • Опухоли яичника, продуцирующие тестостерон • Поликистоз яичников • Нарушения менструального цикла • Аменорея • Бесплодие Уровни тестостерона в норме Изменяющийся уровень тестостерона объясняется эпизодической секрецией ЛГ. У женщин отмечен циркадный ритм тестостерона, что объясняется значительным вкладом надпочечников в синтез андрогенов. Поэтому уровень тестостерона у женщин достигает своего максимума в ранние утренние часы. Повышение концентрации тестостерона может наблюдаться при приеме барбитуратов, кломифена, эстрогенов, пероральных контрацептивов. У мужчин причинами низкого уровня тестостерона могут быть длительный алкоголизм, стресс и физическое истощение. Уровень тестостерона приводится в нмоль/л (1 нг/мл = 3,47 нмоль/л). нг/мл нмоль/л Мужчины 2,9 – 15,1 9,9 – 52,4 Женщины 0,65 – 1,19 2,3 – 4,1 Примечание: С возрастом уровень тестостерона постепенно снижается. Биологический материал: • сыворотка крови • плазма крови. Глобулин, связывающий половые гормоны (ГСПГ) ГСПГ связывает циркулирующие в крови половые гормоны (тестостерон и эстрогены), переводя их в не активную фракцию. ГСПГ синтезируется в печени. Его уровень повышается под действием эстрогенов и тиреоидных гормонов, при беременности, неврогенной анорексии, циррозе печени. Снижение уровня ГСПГ наблюдается при гипотиреозе, гиперандрогенемии, ожирении, заболеваниях печени, ведущих к снижению синтетической способности. Так как половые гормоны, связанные с ГСПГ выбывают из активного пула, снижение его уровня у женщин приводит к явлениям гиперандрогении без повышения уровня общих андрогенов. У мужчин повышение уровня ГСПГ приводит к клинике гипоандрогении при нормальном уровне общего тестостерона. Содержание ГСПГ в норме нмоль/л Мужчины 13-71 Женщины 18-114 Дегидроэпиандростерон сульфат ( DHEAS ) DHEAS является надпочечниковым андрогеном, относящимся к группе 17-кетостероидов. DHEAS образуется из сульфата холестерола. Основное количество DHEAS катаболизируется организмом и только 10 % его выделяется с мочой. Ежесуточно в кровяное русло выделяется 10 - 20 мг DHEAS (35 - 70 моль) у мужчин и 3,5 — 10 мг (12 — 35 моль) у женщин. Секреция DHEAS не имеет циркадного ритма, для этого стероида нет также специфических стероидсвязывающих сывороточных белков, поэтому концентрация DHEAS не зависит от изменения содержания этих белков в сыворотке крови. Однако DHEAS способен связываться с альбумином сыворотки крови человека. Помимо DHEAS в крови циркулирует DHEA (дегидроэпиандростерон) DHEA синтезируется в основном корой надпочечников и, частично, половыми железами. Он образуется в 4 раза медленнее, чем DHEAS , у мужчин и в 2 раза медленнее у женщин. Скорость его метаболизма значительно выше, поэтому концентрация циркулирующего DHEA может быть в 1 000 раз ниже, чем DHEAS . Высокая концентрация в крови, длинный период полу-жизни и высокая стабильность делают DHEAS отличным индикатором андрогенсекретирующей функции надпочечников. Повышенный уровень тестостерона у женщин может иметь надпочечниковое или овариальное происхождение. Результаты определения DHEAS позволяют выявить причину гиперандрогении. Патология: • Значительное повышенная концентрация DHEAS (наблюдается только при гиперандрогении надпочечникового происхождения): • андрогенсекретирующих опухолях надпоче-чников, • двусторонней врожденной гиперплазии надпочечников с гиперандрокортицизмом (дефект 21-гидроксилазы и 11- ß-гидроксилазы) • гирсутизме надпочечникового происхождения • синдром Кушинга • эктопический синтез АКТГ. • Умеренное повышение может быть при поликистозе яичников. • Снижение наблюдается при недостаточности коры надпочечников Показания к проведению исследований: • Опухоли надпочечников • Дифференциальная диагностика овариальных нарушений • Остеопороз • Задержка полового развития Содержание DHEAS в норме мкг/дл мкмоль/л Мужчины 80 – 560 2,2 – 15,2 Женщины 35 – 430 0,9 – 11,7 Биологический материал: • Кровь • Гепаринизированная плазма крови 17-гидрокси-прогестерон 17-гидроксипрогестерон – это промежуточный продукт синтеза стероидов в корковом слое надпочечников и гонадах. Основное клиническое значение определения 17ОН-прогестерона состоит в выявлении дефицита 21-гидроксилазы (фермента, под действием которого 17ОН-прогестерон превращается в11-дезоксикортизол в каскаде стероидогенеза). Дефицит 21-гидроксилазы является самой распространенной формой (90% случаев) врожденной гиперплозии коры надпочечников (ВГКН, адрено-генитальный синдром). Нарушение синтеза 11-дезоксикортизола приводит к дефициту кортизола и альдостерона, повышению уровня АКТГ, гиперплазии коры надпочечников и усилению секреции надпочечниковых андрогенов. Дефицит альдостерона приводит к формированию синдрома потери соли, который проявляется кризами у 75% новорожденных с ВГКН, в более старшем возрасте кризы могут провоцироваться интеркурентными заболеваниями. Избыточная продукция андрогенов, особенно андростендиона, вызывает вирилизацию, которая служит характерным признаком этой формы ВГКН. У девочек вирилизация начинается еще во внутриутробном периоде и к моменту рождения может достигнуть разной степени от клиторомегалии до полного сращения губно-мошоночных складок и формирования уретры, открывающейся в тело полового члена. После рождения у мальчиков и девочек наблюдается увеличение полового члена/ клитора, угри, ускоренный рост, раннее оволосение лобка. Рост детей 3-10 лет опережает сверстников, в 11-12 лет происходит закрытие эпифизарных зон, поэтому нелеченные дети остаются низкорослыми. Характерны нарушение полового развития и бесплодие, однако, лечение может обеспечить нормальное формирование вторичных половых признаков и фертильность. Особое внимание следует обратить на женщин с невыраженными проявлениями ВГКН, которые обращаются к гинекологам-эндокринологам с жалобами на нарушение менструального цикла, гирсутизм и бесплодие. Содержание 17ОН-прогестерона в норме: нг/мл новорожденные 5-30 дней 0,7-2,5 31-60 дней мальчики 0,8-5,0 девочки 0,5-2,3 дети 3-14 лет 0,7-1,7 мужчины 0,5-2,1 женщины фоликулиновая фаза 0,1-0,8 овуляция 0,3-1,4 лютеиновая фаза 0,6-2,3 постменопауза 0,13-0,5 беременные 3 триместр 2,0-12,0 Биологический материал: • Кровь • Гепаринизированная плазма крови Антитела к сперме Около 15% всех семейных пар, желающих иметь детей, страдают бесплодием. Предполагают, что у 10 из 100 бесплодных пар бесплодие имеет иммунологические причины. Одной из таких причин может быть выработка специфических антител к поверхностным белкам сперматозоидов, которые влияют на подвижность и функции мужских половых клеток. Метод иммуноферментного определения антител к сперме может быть использован для проведения скрининговых обследований по выявлению бесплодия, обусловленного иммунологическими механизамами. В случае бесплодия неясной этиологии рекомендуется проводить исследование на наличие антител к сперме обоим супругам. Показано, что тесты на выявление антител к сперме могут так же применяться для контроля за проводимой терапией. Пограничная концентрация антиспермальных антител в сыворотке 75 Е/мл. Пробы с концентрацией превышающей 75 Е/мл считаются положительными. Хорионический гонадотропин (ХГЧ) Хорионический гонадотропин — наиболее важный из гестационных гормонов. ХГЧ продуцируется клетками синцитиотрофобласта плаценты и некоторыми опухолями. Подобно гипофизарным гонадотропинам, ХГЧ является гликопротеином с молекулярной массой 40 кДа, который состоит из двух субъединиц. ß-субъединица ХГ содержит значительную часть аминокислотной последовательности ß-субъединицы ЛГ, а также 30 аминокислот на С-конце молекулы. В результате такой молекулярной гомологии возможность иммунохимической дифференциации ХГЧ и ЛГ зависит от способности антител определять небольшую часть молекулы ХГЧ, структурно отличающуюся от ЛГ. Использование моноклональных антител или специально обработанных поликлональных антител в ряде случаев делает возможным разрабатывать методы определения ХГЧ с пренебрежимо малой перекрестной реакцией с ЛГ, ФСГ и ТТГ. Физиологические функции ХГЧ Определяемые количества ХГЧ появляются в крови матери уже на 8-9 день после оплодотворения яйцеклетки. Во время первого триместра беременности уровень ХГЧ быстро возрастает, удваиваясь каждые 2-3 дня. Концентрация ХГЧ достигает своего максимума на 8-10 неделе беременности, после чего несколько снижается и остается постоянной в течение второй половины беременности. Быстрое возрастание концентрации ХГЧ в периферической крови и моче делает определение ХГЧ идеальным видом анализа для быстрой диагностики беременности. Физиологическая роль ХГЧ в ранние сроки беременности состоит в стимуляции синтеза прогестерона желтым телом. Считается также, что ХГЧ стимулирует синтез тестостерона половыми железами плода мужского пола, а также оказывает воздействие на кору надпочечников эмбриона. При удалении матки, после родов или аборта ХГЧ детектируется в течение более длительного периода, чем это следует из периода его полу-жизни. Уровень ХГЧ возвращается в норму в течение 2-3 недель после хирургического вмешательства; если уровень ХГЧ не снижается, это указывает на неполное удаление матки или эктопическую беременность. Высокий уровень ХГЧ после миниаборта указывает на продолжающуюся беременность. Патология: Беременные женщины: При внематочной беременности уровень ХГЧ в сыворотке крови и моче значительно ниже, чем при нормальной беременности в соответствующие сроки, либо его уровень повышается медленнее. Однако в случае имплантации эмбриона в достаточно благоприятном месте, уровень ХГЧ может повышаться, до значений, характерных для нормальной беременности. Таким образом, определение ХГЧ можно проводить в целях диагностики внематочной беременности. В случае положительного анализа на ХГЧ проводят дальнейшие исследования, в том числе эхографию, для дифференциации маточной и внематочной, физиологической и патологической беременности. Пониженная концентрация гормона наблюдается при угрожающем или несостоявшемся выкидыше. Для подтверждения диагноза рекомендуется проводить повторные измерения уровня ХГЧ в динамике и ультразвуковое обследование. В последние годы при повышенном уровне ХГЧ проводят определение альфа-фетопротеина (АФП) и других независимых маркеров для пренатальной диагностики синдрома Дауна. Кроме того, при повышении уровня ХГЧ необходимо исключать внутриматочную инфекцию. При пузырном заносе (хорионаденоме) происходят изменения в хориальных ворсинах. Возрастает активность клеток синцитиотрофобласта, что влечет за собой гиперсекрецию ХГЧ. Если в случае нормальной беременности уровень ХГЧ снижается после 10 недели беременности, то при хорионаденоме он продолжает возрастать и может достигнуть миллиона МЕ/л. Оптимальная диагностическая информация достигается при использовании ультразвуковой эхографии. Повышенные уровни у больных со злокачественными заболеваниями • опухоли трофобласта или терминального происхождения • рак яичек • рак яичников • хорионкарцинома • пузырный занос • рак желудка • рак печени • рак тонкой кишки • рак толстой кишки • рак почек • мелкоклеточный бронхогенный рак легких (эктопическая секреция) • рак яичников • рак молочных желез (эктопическая секреция) • рак матки Женщины: Злокачественные опухоли трофобласта. Злокачественные новообразования возникают у 5-10 % пациенток с хорионаденомой. Поэтому после удаления хорионаденомы необходимо проводить регулярное обследование пациенток до тех пор, пока уровень ХГЧ не перестанет детектироваться. В течение, как минимум, полугода анализ ХГЧ должен проводиться ежемесячно, в течение 2 последующих лет анализ проводят через более длительные промежутки времени. Определение ХГЧ при лечении пролиферирующих опухолей и хориокарцином цитостатическими агентами позволяет оценить эффективность терапии. Три отрицательных анализа с интервалами в три недели свидетельствуют о ремиссии. В дальнейшем мониторинг проводится, как в случаях беременности с пузырным заносом. Определение а-субъединицы ХГЧ имеет прогностическое значение, так как увеличение ее уровня свидетельствует об ухудшении состояния больной. Мужчины: Уровень ХГЧ определяют в случае злокачественных новообразований (например, тератом и других тестикулярных опухолей). Хотя уровень ХГЧ не всегда повышается до минимально детектируемого, или повышается только уровень свободных субъединиц, анализ ХГЧ позволяет оценить эффективность проводимой терапии. Показания к проведению исследований: Беременные женщины: • Детекция беременности • Внематочная беременность • Диагностика угрожающего выкидыша • Пузырный занос (хорионаденома) • Злокачественные опухоли трофобласта • Диагностика врожденных злокачественных опухолей плода • Хромосомные аберрации плода Мужчины и небеременные женщины: • Тестикулярные опухоли • Тератомы и тератобластомы Содержание ХГЧ в норме ( МЕ/л ) Мужчины 0-2,5 Небеременные женщины 0-5,3 Беременность: Гестационный возраст (недели) Медиана (интервал значений) 2-3 300 (150-600) 3-4 700 (360-1400) 4-5 14000. (9000 –21000) 5-6 80000 (40000 –120000.) 6-7 155000 (130000 –200000) 7-8 185000 (150000 –220000) 9 175000 (140000 –210000) 10 170000 (135000 – 205000) 11 140000 (120000 –160000) 12 115000 (100000 -130000) 13 100000 (90000 – 110000) 14 90000 (80000 – 100000) 15 31700 (15900-63400) 16 27100 (13500-54100) 17 23100 (11000-46200) 18 21600 (10800-43200) 19 18200 (9100 – 36400) 20 16400 (8200-32800) 21 14600 (7300-29200) 22 12500 (6300-23000) 23 11000 (5500 – 22000) >24 7000 (3500 – 14000) Биологический материал: • сыворотка крови • гепаринизированная плазма крови • моча • амниотическая жидкость. Альфафетопротеин (АФП ) АФП является специфическим фетальным а-глобулином с молекулярной массой 65-70 кДа. Первоначально АФП вырабатывается желтым телом. Начиная с 13 недели беременности, когда его уровень достигает максимума в сыворотке крови плода (3 мг/мл), он начинает синтезироваться печенью плода, и его уровень постепенно снижается до 0,08 мг/мл к моменту родов. В течение первого года жизни уровень АФП снижается до очень низких значений, характерных для взрослого человека. Диагностическое значение АФП во время беременности Во время физиологической беременности уровень АФП в амниотической жидкости снижается, а в материнской сыворотке, напротив, возрастает. Увеличение уровня АФП всегда служит показателем наличия серьезных нарушений. Возможность определять дефекты незаращения нервной трубки плода (расщелину позвоночника, анэнцефалию) на базе повышенного уровня АФП в амниотической жидкости, полученной при отхождении околоплодных вод на 15-20 месяце, была показана в 1970г. Затем повышенный уровень АФП в амниотической жидкости стали связывать с наличием других аномалий развития плода. Диагностика врожденных аномалий по уровню АФП в материнской сыворотке (MC АФП) основывается на тех же принципах. Так как физиологический уровень АФП зависит от срока беременности, результаты анализа МС АФП наиболее часто оценивают по отношению к среднему значению уровня АФП, характерному для данного срока Повышение уровня МС АФП в 2,5 и более раз выше нормы наблюдается при серьезных патологических состояниях, угрожающем выкидыше или гибели плода. Понижение уровня АФП по сравнению с уровнем нормально развивающейся беременности может свидетельствовать о риске рождения ребенка с трисомией по 21 хромосоме. Однако, поскольку уровень АФП при патологической беременности (при трисомии) составляет лишь 0,7 от его уровня при физиологической беременности, рекомендуется анализ АФП комбинировать с определением других независимых маркеров, например, ХГЧ или его субъединиц, свободного эстирола и др. Некоторые авторы советуют использовать анализ МС АФП в качестве дополнительного анализа при осложненной беременности. Патология: Повышенные уровни у больных со злокачественными опухолевыми заболеваниями: • первичный рак печени (за исключением анапластической формы, при которой АФП - отрицательный) • метастазы злокачественных опухолей в печень(при бронхогенной карциноме, раке молочной железы и раке прямой и сигмовидной кишки). • опухоли терминального происхождения • рак яичника • рак яичка • рак желудка • рак толстой кишки • рак поджелудочной железы • рак молочной железы • бронхиальные опухоли Повышенные уровни при заболеваниях доброкачественной этиологии : • цирроз печени • острый вирусный гепатит • хронический гепатит • хроническая почечная недостаточность Показания к проведению анализа: Беременные женщины : • Контроль за ходом 1-ого триместра беременности • Угроза выкидыша • Диагностика врожденных пороков развития • Диагностика хромосомных аберраций Пациенты с опухолями : • Гепатоцеллюлярная карцинома • Злокачественные опухоли желчного пузыря, желчных путей и поджелудочной железы • Тестикулярные опухоли • Тератомы, тератобластомы • Опухоли, имеющие эмбриональное происхождение Содержание АФП в норме Результаты обычно выражаются в МЕ/мл (1 МЕ/мл = 1,21 нг). МЕ/мл нг/мл Вне беременности 0,5 – 5,5 0,6 – 6,66 Во время беременности: Гестационный возраст (недели) Медиана (интервал), МЕ/мл 14 21,7 (10,9-21,8) 15 25,0 (12,5-50) 16 28,8 (14,4-57,6) 17 33,1 (16,5-66,2) 18 38,0 (19-76) 19 43,8 (21,9-87,6) 20 50,4 (25,2-100,8) 21 57,9 (28,9-115,8) 22 66,2 (33,1- 132,4) 23 90,0 (45-180) Биологический материал: • сыворотка • гепаринизированная плазма • амниотическая жидкость • кистозная жидкость • асцитическая жидкость Неконъюгированный эстриол Эстриол является стероидным гормоном, синтезируемым плацентой. На первой стадии синтеза, которая происходит в эмбрионе, холестерин, образующийся de novo, либо поступающий из крови матери, превращается в прегненолон, который сульфатируется корой надпочечников плода в дегидроэпиандростеронсульфат. Гидроксилирование этого соединения по 16 а-положению и отщепление сульфата сульфатазами плаценты приводит к образованию эстриола. Поскольку в образовании эстриола принимают участие как плод, так и плацента, измерение уровня эстриола может служить идеальным показателем функции фето-плацентарной системы. Физиологические функции эстриола В материнской крови только небольшая часть эстриола циркулирует в свободном состоянии, основное его количество составляет глюкуронид а-сульфата Во время беременности уровень эстриола постепенно возрастает до 40 недели. Пониженный уровень эстриола или его резкое снижение свидетельствует о патологическом состоянии плода. Определение уровней общего или свободного эстриола используют для мониторинга беременности. Уровень свободного эстриола быстрее отражает ухудшение состояния плода. Патология Определение эстриола используют для наблюдения за состоянием фетоплацентарной системы , а также для диагностики Уровень неконъюгированного эстриола снижается при : • осложненном течении беременности (поздний гестоз, анемия, пиелонефрит, хронические заболевания ЖКТ, патология надпочечников у беременной), сопровождающемся нарушением плацентарного кровообращения и возникновением плацентарной недостаточности, развитием гипоксии и ацидоза у плода • внутриутробной гипотрофии плода • алкогольном синдроме плода • внутриутробном инфицировании плода • некоторых видах наследственной патологии (врожденной гипоплазии надпочечников, синдроме Дауна, анэнцефалии и др.) • нарушения сульфатазной активности плаценты (редкое врожденное заболевание, связанное с Х-хромосомой). Отсутствие этого фермента блокирует синтез эстриола из предшественников, что отражается в очень низком уровне эстриола при беременности без каких-либо других признаков неблагополучия плода. Такие беременности часто заканчиваются хирургическим вмешательством в процесс родов, причем рождаются исключительно младенцы мужского пола с признаками ихтиоза, появляющегося вскоре после рождения. • применении кортикостероидов (например, для стимуляции созревания легочной ткани плода) • применении некоторых антибиотиков. Уровень неконъюгированного эстриола повышается при: • почечной недостаточности. Показания к проведению исследований: Беременные женщины : • Мониторинг состояния плода в третьем триместре беременности • Диагностика хромосомных аберраций Уровни неконъюгированного эстриола в норме Гестационный возраст (недели) Медиана, нмоль/л Интервал, нмоль/л 6-7 1,19 0,98-1,38 8-9 1,63 1,37-1,89 10-12 4,03 2,3-5,77 13-14 7,72 5,74-9,68 15-16 10,0 5,4-21,0 17-18 12,0 6,6-25,0 19-20 14,93 10,76-19,1 21-22 24,48 19,34-29,62 23-24 28,33 22,11-34,54 25-26 30,80 23,40-38,19 27-28 32,55 24,39-40,71 29-30 35,38 28,09-42,67 31-32 45,63 35,01-56,26 33-34 43,0 39,08-46,93 35-36 51,68 44,77-53,59 37-38 63,68 54,90-72,47 39-40 65,07 57,61-72,53 Трофабластический ß - гликопротеин (ТБГ) ТБГ синтезируется клетками трофобласта и является специфическим маркером беременности. В низких концентрациях (0,2-5,0 нг/мл) он определяется в крови здоровых небеременных женщин. Уже со 2 недели его уровень существенно возрастает, что позволяет использовать этот тест для ранней диагностики беременности. При нормальном течении беременности уровень ТБГ прогрессивно возрастает до 20-24 недели, затем стабилизируется и резко падает накануне родов. В послеродовом периоде содержание ТБГ через 30 – 40 часов уменьшается вдвое, а к 16 дню достигает уровня здоровых небеременных женщин. Одним из физиологических эффектов является его иммуносупрессивное действие, что необходимо для нормального развития беременности. Патология: Снижение: • Менее 500нг/мл при сроке 3-5 недель: • Внематочная беременность • Функциональная недостаточность трофобласта • Резкое снижение в более поздние сроки указывает на угрозу спонтанного преждевременного прерывания беременности (при падении в 6 раз в 100% случаев, а в 2-4 раза в 33,3% случаев) • Уменьшение концентрации ТБГ в ходе лечения угрожающего выкидыша говорит о неэффективности терапии • Медленное увеличение содержания ТБГ по мере развития беременности или стабилизации его показателей указывает на вероятность позднего выкидыша или преждевременных родов • Снижение ТБГ наблюдается при наличии у плода трисомий Повышение: • Многоплодная беременность • Сахарный диабет • Резус-конфликтная беременность (уровень ТБГ увеличивается пропорционально тяжести гемолитической болезни плода) • Перенашивание • Онкологические заболевания (мониторинг течения и эффективности терапии): • Рак матки • Рак яичников • Хорионкарцинома (ТБГ/ХГЧ = 0,1 – 1,0) • Инвазивный занос (ТБГ/ХГЧ = 1,2 – 4,5) • Пузырный занос (ТБГ/ХГЧ = 6,0 – 12,0) • Анэнцефалия плода (наряду с исследованием АФП, ХГЧ и неконьюгированного эстриола). Содержание ТБГ в норме Гестационный возраст (недели) ТБГ, нг/мл 2-3 50-150 3-4 150-300 4-5 300-500 5-6 500-1500 6-7 1500-3000 7-8 3000-5000 9 8000 - 10000 10 10000 - 13000 11 13000 - 17000 12 15000 – 18000 13 17000 – 20000 14 19000 – 24000 15 20000 –25000 16 22000 – 28000 17 25000 – 30000 18 30000 – 35000 19 32000 – 37000 20 33000 - 38000 21 35000 - 40000 22 37000 – 42000 23 40000 – 45000 24 45000 – 55000 25 55000 – 100000 26 100000 -200000 27 200000 –300000 28 300000 –400000 29 –40 400000 –500000 Биологический материал: • Кровь • Сыворота крови ПАПП-А (РАРР-А) Белок РАРР-А (pregnancy associated plazma protein A) впервые был обнаружен в сыворотке крови беременных с помощью метода иммунодиффузии в 1974г. РАРР-А вырабатывается у беременных женщин трофобластом, у небеременных - клетками гранулезы, слизистой обочлочкой маточных труб и эндометрием, а у мужчин - клетками Лейдига. Молекулярная масса РАРР-А 200 кД. В сыворотке крови беременных РАРР-А находится в комплексе с проформой основного протеина эозинофилов, что позволяет ему разрывать мембрану цистосом и оказывать повреждающее воздействие на ткани. Подобный эффект вероятно необходим в процессах нидации плодного яйца и развития трофобласта. РАРР-А принимает участие в регуляции кровотока в межворсинчатом пространстве за счет ингибирования гемолиза, индуцированного системой комплимента, угнетает активность плазмина и имеет аффинитет к гепарину. РАРР-А in vitro до-зозависимо ингибирует пролиферативную активность лимфоцитов, индуцированную лейкинами или аллогенными клетками, поэтому он входит в группу белков-иммуносупрессоров. Рост сывороточной концентрации РАРР-А при беременности зависит от массы плацентарных клеток. Прогностическая ценность по диагностике плацентарной недостаточности (ПН) у РАРР-А ниже, чем у трофобластического ?1-гликопротеина (ТБГ). При ПН уровень РАРР-А снижается, а при начавшемся самопроизвольном выкидыше, сопровождающемся деструкцией клеток синцитиотрофобласта - повышается. Особый интерес исследования РАРР-А представляют для диагностики синдромов хромосомных трисомий плода по 21 (синдром Дауна), 18 (синдром Эдвардса), 13 (синдром Патау) хромосомам в I триместре беременности. Исследования показали, что уровень РАРР-А в сыворотке крови при названных синдромах снижается в сроке 9-13 недель менее 0,5 Мом. Для синдрома Дауна снижение РАРР-А выявлено в 65%, для синдромов Эдвардса и Патау до 70% случаев, при ложноположительных результатах 5%. Обнаружено снижение РАРР-А менее 0,5 Мом при синдроме Корнелии де Ланге. Рекомендуется проводить определение РАРР-А оптимально с 9 до 11 недель (по последней менструации), за 7-10 дней до УЗИ эмбриона с измерением толщины его воротникового пространства (ТВП). Содержание РАРР-А в сыворотке крови при беременности в норме: Недели беременности по последней менструации Медиана (Мом), ug/ml Допустимые значения 0,5 Мом, ug/ml 2 Мом, ug/ml 8 2600 1300 5200 9 4200 2100 8400 10 7560 3780 15120 11 11000 5500 22000 12 15060 7530 30120 13 17000 8500 34000 14 21510 10750 43020 Коэффициенты пересчета единиц измерения: 1 mIU/ml = 450 ug/ml 1 ug/ml=2220 mIU/ml